Практическая работа

1. Определение минимальной и максимальной осмотической резистентности эритроцитов. Цель опыта: ознакомление с методом определения минимальной и максимальной осмотической резистентности эритроцитов.

Ход работы: в 7 пробирках готовят растворы поваренной соли в следующих концентрациях; 0,5; 0,45; 0,4; 0,35; 0,3; 0,25; 0,2. Эти растворы готовят из 1% раствора поваренной соли и воды.

№№ пробирок концентрация соли количество мл 1% раствора соли количество мл воды

0,5 1,0 1,0

0,45 0,9 1,1

0,4 0,8 1,2

0,35 0,7 1,3

0,3 0.6 1,4

0,25 0,5 1,5

0,2 0,4 1,6

В каждую пробирку добавляют дефибринированную кровь по 3 капли (или 40% взвесь отмытых физиологическим раство­ром эритроцитов). Пробирки встряхивают и оставляют на 1 час. Через час отмечают концентрацию NaCl, при которой на­блюдается начало и конец гемолиза, т.е. границы минимальной и максимальной резистентности.

2. Изменение эритроцитов при сдвигах осмотичес­кого давления крови. Цель опыта: ознакомление с изменением формы эритро­цитов в растворах с различной концентрацией поваренной соли.

Ход работы: на 3 предметных стекла помещают по 2 кап­ли гипертонического – 3%, изотонического – 0,9% и гипотони­ческого – 0,3% раствора поваренной соли. Прибавляют в каждый раствор по 1 капле крови. Накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом. Данные наблюдения зарисо­вывают и дают объяснение изменения формы эритроцитов.

3. Реверсия гемолиза. Цель опыта: ознакомиться с обратимостью процесса ге­молиза.

Ход работы: в пробирку набирают 2 см³ 0,4% раствора NaCl и добавляют 2–3 капли крови. Через 1 час каплю этого раствора рассматривают под микроскопом. Отмечают состояние эритроцитов. В пробирку с гемолизированной кровью добав­ляют гипертонический 3% раствор поваренной соли. Это спо­собствует нормализации осмотического давления, возвращению эритроцитов в исходное состояние, т. е. наблюдается реверсия гемолиза.

4. Определение СОЭ. Цель опыта: освоить методику определенияСОЭ с помощью прибора Панченкова.

Ход работы. Капилляр промы­вают 5% раствором цитрата натрия. Набирают цитрат натрия до метки Р и выдувают его на часовое стекло. В тот же ка­пилляр двухкратно набирают кровь из пальца человека до метки К (О). Обе порции крови выпускают на часовое стекло, смешивая с имеющимся там цитратом натрия. Полученную смесь набирают в капилляр до метки О и ставят в штатив на 1 час. По прошествии 1-го часа смотрят какова высота в миллиметрах образовавшегося верхнего столбика плазмы в капилляре. Его величина и является мерой СОЭ.

5. Наблюдение буферных свойств плазмы крови (опыт Фриденталя). Цель опыта: наглядная демонстрация буферных свойств плазмы крови.

Ход работы: Берут 2 чистых стаканчика и наливают в один 5 мл плазмы, а в другой 5 мл воды, прибавляют в оба стаканчика по капле метилового оранжевого и, считая капли, титруют 0,1 н раствором соляной кислоты до появления неисчезающего при взбалтывании красного окрашивания. Отмечают количество капель, пошедших на титрование воды и плазмы. Делают выводы.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ:

1. Электролитный состав плазмы.

2. Гуморальные факторы иммунитета, находящиеся в плазме крови.

3. Свойства и функции отдельных белковых фракций.

4. Синтез и обновление белков плазмы.

Дата добавления: 2017-02-01