Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Определение ферментов, участвующих в процессе дыхания у бактерий с различным типом дыхания (окислительные формы)





Определение протеолитической активности микробов

 

Для определения данной активности исследуемую культуру микроба засевают в питательную среду, содержащую тот или иной белок.

Посев на желатин. К МПБ добавляют мелко нарезанный желатин на 100 мл 10-15гр. Она набухает и растворяется при медленном нагревании. Добавляют 10% раствор питьевой соды до PH = 7, фильтруют. Разливают в пробирки столбиком. Стерилизуют текучим паром. При наличии желатиназы происходит расщепление белков желатины в форме: «чулка» - стафилококк, «воронки» - холерный вибрион, «перевернутой елочки» - возбудитель сибирской язвы. Наблюдение за посевом ведется до 20 суток.

Определение индола по Мореллю. Индол образуется при расщеплении триптофана. На исследуемую культуру засевают в б/м Хоттингера, где содержится триптофан. Сразу после посева под пробку вносят полоску индикаторной бумаги, пропитанную щавелевой кислотой. Посевы инкубируют при 37С 24-48 часов. Образование индола в бульоне сопровождается окрашиванием нижнего конца индикаторной бумаги в слабо розовый цвет.

Определение индола с помощью реактива Ковача. В пробирку наливают 5 мл исследуемой культуры. Вносят 1 мл ксинола или эфира, встряхивают. После отстаивания осторожно добавляют раствор Ковача так, чтобы он образовал слой между ксинолом и средой. При положительной реакции появляется красное кольцо. Реакция высоко чувствительная.

Проба на H2S. Исследуемую культуру засевают на питательную среду, содержащую сульфат железа. При появлении H2S среда чернеет за счет образования сернистого железа. Образование H2S связано с расщеплением серосодержащих аминокислот, чаще цистеина. Определить H2S можно с помощью индикаторной бумажки, пропитанной ацетатом свинца — бумажка чернеет.

 

 

Определение каталазы. Данной активностью обладают анаэробы факультативные и аэробы. Каталаза расщепляет H2O2 на атомарный кислород и воду. В пробирку наливают 1-2 мл испытуемой бульонной культуры, добавляют несколько капель 3% H2O2 в присутствии каталазы выделяются пузырьки газа.



Реакция на цитохромоксидазу. Данный фермент имеется у бактерий с аэробным типом дыхания. К культуре добавляют по несколько капель 1% спиртового раствора L-нафтола и 1% водного раствора метола. Положительная реакция проявляется в появлении лиловой окраски.

Определение пути утилизации глюкозы на ОФС. Среда позволяет дифференцировать окислительный путь утилизации глюкозы от ферментативного. Среда содержит набор солей, пептидов, индикатор бромтимол синий, агар. Культуру засевают уколом в 2 пробирки с ОФС, разлитой столбиком. В одну пробирку поверх агара наливают вазелиновое масло. Посевы термостатируют 3-4 суток. При образовании из глюкозы кислоты происходит изменение цвета индикатора (из зеленого в желтый). Образование кислоты в пробирке без масла указывает на окислительную утилизацию глюкозы. Образование кислоты в обеих пробирках говорит от преобладании бродильных процессов. Отсутствие изменения цвета среды в двух пробирках свидетельствует об отсутствии утилизации глюкозы вообще.

 





Дата добавления: 2013-12-13; Просмотров: 1948; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



ПОИСК ПО САЙТУ:


Читайте также:

  1. II. Определение «целей» и «предметов» переговоров.
  2. III этап. Определение правовых отношений родителей и детей.
  3. VII. Работа продавца с покупателем в процессе принятии решения о покупке
  4. X.1. Определение мышления.
  5. Аналитическое определение передаточного отношения.
  6. Аналитическое определение передаточного числа.
  7. Бактериологический метод исследования — 3 этап. Идентификация чистой культуры бактерий
  8. Биотехнология в сельском хозяйстве. Вирусные энтомопатогенные препараты. Бактериальные удобрения на основе клубеньковых бактерий.
  9. Более 55 млн га ( 5,4 млн земельных долей ) передано в аренду с определением местоположения земель на местности.
  10. В процессе межличностной коммуникации осуществляется взаимодействие одного человека с другим или с группой.
  11. В процессе физического воспитания детей 7-17 лет
  12. В процессе хозяйственной деятельности выделяют четыре стадии: производство, распределение, обмен, потребление.

studopedia.su - Студопедия (2013 - 2022) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление
Генерация страницы за: 0.018 сек.