Условия культивирования аэробов

Метод Коха

Метод Дригальского

Готовят три чашки Петри с стерильной питательной средой. В первую чашку наносят пипеткой одну каплю материала. Распределяют по поверхности стерильным шпателем (посев газоном). Этим же шпателем (не обжигая его и не внося материала) проводят посев газоном на вторую чашку, а затем третью чашку.

Варианты метода Дригальского:

1. Каплю материала помещают на край чашки со средой, растирают шпателем на небольшом участке, а затем растирают шпателем всю поверхность не касаясь участка с материалом.

2. Посев исследуемого материала бакпетлей на сектора чашки Петри.

Готовятся резведения исследуемого материала. В каждую пробирку с разведениями наливают расплавленный и охлажденный до 45ºС питагар. Перемешивают и содержимое пробирок выливают в чашки Петри для застывания. Чашки Петри с засеянным материалом ставятся вверх дном в термостат на 37ºС на 18-20 часов для выращивания (культивирования) бактерий.

Культивирование аэробных бактерий проводят на жидких и плотных питательных средах при постоянной температуре (в термостате).

1. Температура. Оптимальная температура для большинства патогенных бактерий 37ºС.

2. Сроки культивирования. Для большинства патогенных бактерий 18-20 часов при росте на плотных средах и 6-8 часов — на жидких средах. Микобактерии туберкулеза культивируются до 6 недель.

3. Свет. Патогенные бактерии равнодушны к свету. Растут в темноте. Для выявления пигментов необходим свет.

4. Влажность. Необходимо использовать свежеприготовленные среды. Для влаголюбивых культур (коклюш, менингококк) в термостат ставят сосуд с водой.

5. Аэрация — достаточно пассивной аэрации — кислорода поступающего через ватно-марлевые пробки и зазора между крышкой и дном чашки Петри.

Второй этап исследования — изучение изолированных колоний (культуральные свойства) и получение чистой культуры. После термостатирования изучают культуральные свойства колоний, микроскопируют (готовят мазок из части колонии и окрасить по Граму) и подозрительные колонии бакпетлей штрихом пересевают на скошенный агар для накопления чистой культуры.

Засеянные пробирки помещают в термостат 37ºС на 18-20 часов. После получения чистой культуры приступают к третьему этапу исследования.

Дата добавления: 2013-12-13