Анализ полового хроматина X в мазках периферической крови

Интерпретация теста Барра

Число телец Барра = числу хромосом X -1

В норме тельце Барра представлено в одном экземпляре в клетках женщин и отсутствует у мужчин, так как мужчины имеют в кариотипе только одну хромосому X, которая является активной, в то время как в кариотипе женщин 2 хромосомы X, одна из которых инактивируется путем гетерохроматинизации, образуя тельце Барра.

Хотя теоретическая частота хроматина X в клетках слизистой полости рта составляет 100%, практически можно выявить тельце Барра только в 30-40% клеток. Это обусловлено следующими факторами:

- исключением из подсчета центрально расположенных хромоцентров;

- наложением некоторых клеток друг на друга, что затрудняет точный анализ;

- дефектами окрашивания;

- наличием Барр-отрицательных клеток, как следствие нарушений в конденсации хромосомы X;

- другими причинами: возрастом, овариальным циклом, болезнями, приемом некоторых лекарственных препаратов.

В патологических случаях, связанных с нарушением числа хромосом X (дисгенезия гонад), тельце Барра может: выявляться у мужчин (47ДХУ), отсутствовать у женщин (45,Х) или присутствовать в дополнительных экземплярах у обоих полов (полисомии X).

Величина тельца Барра зависит от размеров инактивированной хромосомы X; она может быть: больше 1 микрона в случае isoXq, дупликации хромосомы X; меньше 1 микрона в случае isoXp, делеции хромосомы X, кольцевой хромосомы X.

Если на одном и том же препарате встречаются клетки с разным числом телец Барра, то учитывется их максимальное количество в клетке (см.частоту телец Барра).

Хроматин X можно также выявить в ядрах полиморфноядерных нейтрофилов на препарах окрашенных по MAY-GRUNWALD-GIEMSA, в виде ядерных придатков. Ядерные придатки типа А имеют форму барабанных палочек (“drum stick”), соединенных нитевидным образованием с одной из долей ядра полиморфноядерного нейтрофила; ядерные придатки типа В, или "сидячие узелки" ("sessile nodules") имеют сходные с барабанными палочками размеры и форму, но связаны непосредственно с ядром. Величина ядерных придатков в обоих случаях составляет около 1,5 микрона.

В норме частота ядерных структур варьирует (1/6 - 1/98 ПМН) и, в среднем, составляет 38%. На практике на одном препарате должно быть выявлено не менее 6 типичных ядерных придатков для заключения о наличии хроматина X (положительный результат). Вывод об отрицательном тесте на хроматин X делается, если просмотрено не менее 500 нейтрофилов и не выявлено ни одного ядерного придатка.

Интерпретация результатов основана на тех же правилах, что и тест Барра:

Число ядерных придатков = числу хромосом Х – 1

Хроматин Y представляет 2/3 дистального плеча q хромосомы Y и в норме выявляется в интерфазных клетках мужчин. Для окрашивания используется флуоресцентный краситель куинакрин. Микроскопический анализ проводят в ультрафиолетовом свете, используя люминесцентный микроскоп. Хроматин Y выявляется в виде светящегося (флюоресцирующего) образования, в связи, с чем и был назван тельцем F. Тельце может быть расположено свободно или прикреплено к ядерной мембране; размеры его составляют около 0,25 микрона, а частота варьирует в различных клетках мужского организма:

■ 70-80% в фибробластах;

■ 45% в сперматозоидах.

Интерпретация результатов теста F:

Число телец F = числу хромосом Y

Дата добавления: 2014-01-05