Хід роботи

Дослід 1. Якісна реакція на ацетон та ацетоацетатну кислоту (проба Ланге).

Практична робота

Теоретичні питання

1. β-Окиснення вищих жирних кислот (ВЖК):

· локалізація процесу β-окиснення жирних кислот;

· активація жирних кислот. Роль карнітину в транспорті жирних кислот в мітохондрії;

· послідовність ферментативних реакцій в-окиснення жирних кислот;

· енергетика в-окиснення жирних кислот.

2. Механізм окиснення гліцеролу, енергетика цього процесу.

3. Біосинтез вищих жирних кислот:

· локалізація біосинтезу вищих жирних кислот;

· метаболічні джерела синтезу жирних кислот;

· стадії синтезу насичених жирних кислот;

· характеристика синтетази ВЖК, значення ацилтранспортуючого білка, біотину;

· джерела НАДФН + Н⁺, необхідного для біосинтезу жирних кислот;

· послідовність ферментативних реакцій біосинтезу вищих жирних кислот;

· регуляція процесу біосинтезу на рівні ацетил-КоА-карбоксилази та на рівні синтетази жирних кислот;

· елонгація насичених жирних кислот;

· утворення ненасичених жирних кислот.

4. Метаболізм кетонових тіл:

· ферментативні реакції біосинтезу кетонових тіл;

· реакції утилізації кетонових тіл, енергетичне значення;

· метаболізм кетонових тіл в умовах патології. Механізми надмірного зростання вмісту кетонових тіл при цукровому діабеті та голодуванні;

· поняття – кетоацидоз, кетонемія, кетонурія.

Принцип методу. Ацетон та ацетоацетатна кислота з натрію нітропрусидом у лужному середовищі утворюють продукти реакції, забарвлені у червоний колір:

CH₃ – CO – CH₃ + Na₂ [Fe (CN)₅ NO] + 2 NaOH →

→ Na₄ [Fe (CN)₅ NO = CHCOCH₃] + 2 H₂O.

Під дією концентрованої ацетатної кислоти утворюється продукт вишнево-червоного кольору:

Na₄ [Fe (CN)₅ NO =CHCOCH₃] +CH₃COOH →

Na₃ [Fe (CN)₅ NOCH₃COCH₃] + CH₃COONa.

Ацетоацетатна кислота (в енольній формі) здатна також утворювати з ферумом хлориду (III) комплексну сполуку вишнево-червоного кольору (Проба Герхарда).

Матеріальне забезпечення: сеча хворого на цукровий діабет та сеча здорової людини, 10 % розчин натрію нітропрусиду (свіжоприготований), крижана ацетатна кислота, 10 % розчин NaOH, 50 % розчин амонію сульфату, концентрований розчин аміаку, 10 % розчин феруму хлориду (ІІІ), піпетки, пробірки, лійка, фільтрувальний папір.

Беруть 2 пробірки. Наливають по 0,5 мл досліджуваної сечі: у першу пробірку - здорової людини, у другу – хворого на цукровий діабет з кетонурією. В обидві додають по 0,5 мл розчину натрію гідроксиду і 5-7 крапель натрію нітропрусиду. Спостерігають за появою червоного забарвлення в другій пробірці, що приймає вишневий відтінок після додавання декількох крапель концентрованої ацетатної кислоти.

Дата добавления: 2014-11-25