Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Дослід 3. Вивчення системи антиоксидантного захисту. Кількісне визначення активності каталази в крові




Принцип методу. Метод визначення активності каталази базується на визначенні кількості пероксиду водню, перетвореного ензимом за певний проміжок часу.

каталаза

2 Н2О22О + О2

Матеріальне забезпечення: розведена кров (1:1000), дистильована вода, 1% розчин Н2О2, 10 % розчин сірчаної кислоти, 0,1 н розчин КМпО4, колби, піпетки, бюретка.

Хід роботи. Розведену кров (1:1000) наливають по 1 мл в дві колбочки, додають по 7 мл дистильованої води, в дослідну пробу додають 2 мл 1 % Н2О2, а в контрольну – 5 мл 10 % розчину сірчаної кислоти. Дія каталази в кислому середовищі припиняється (в контрольній пробі), так як вона діє при рН 7,4. Колбочки залишають на 30 хв при кімнатній температурі. Потім до дослідної проби додають 5 мл 10 % розчину сульфатної кислоти. А до контрольної – 2 мл 1% розчину Н2О2. Вміст колбочок титрують 0,1 н розчином КМnО4 до рожевого забарвлення.

Каталазне число (Кч) розраховують за формулою:

Кч = (А – В) ´ 1,7

де: А – кількість мл 0,1н р-ну КМnО4, яка пішла на титрування контрольної проби;

В – кількість мл 0,1н р-ну КМnО4, яка пішла на титрування дослідної проби.

В нормі каталазне число становить 10-15 одиниць.

Зробити висновок.

Клініко-діагностичне значення. Антиоксидантні реакції у механізмі захисних процесів організму є провідними і найбільш потужними, оскільки вони не тільки запобігають розвитку вільнорадикальних реакцій, але й забезпечують ефективність елімінації кінцевих метаболітів пероксидного окиснення із залученням їх до енергетичного обміну, тим самим підтримуючи високу активність синтетичних процесів, у тому числі ензимів супероксиддисмутази (СОД), каталази та глутатіонпероксидази (ГПО), які відповідно формують другий і третій ступені захисту. Крім запобігання нагромадженню пероксидів, такий антиоксидантний захист стабільно підтримує високу активність окисно-відновних процесів внаслідок утворення кисню при перетворенні супероксиду в пероксид за участю СОД і гідролізу його каталазою та глутатіонпероксидазою.

У нормі інтенсивність процесів ПОЛ регулюється системою антиоксидантного захисту. Найважливішими компонентами антирадикального і антипероксидного захисту є ензими, які каталізують реакції між активованими формами кисню, здійснюють розпад гідропероксидів. Серед цих ензимів важливе місце займає каталаза, яка прискорює реакцію розщеплення пероксиду водню та деяких його однозаміщених похідних.

В нормі активність каталази в крові людини 25,5-52,2 мкат/л. Підвищення активності каталази спостерігається при хронічній серцевій недостатності, перціозній анемії та макроцитарних анеміях, при введені в організм кофеїну, алкоголю, ацетонових тіл. Зниження активності цього ензиму спостерігається при злоякісних пухлинах, при ряді інфекційних захворювань (черевний тиф, скарлатина, малярія, туберкульоз легень).




Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2014-11-25; Просмотров: 664; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.01 сек.