Подсчет клеток на мембранных фильтрах

Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках (метод Виноградского-Брида)

Подсчет клеток в капиллярах Перфильева

Подсчет клеток в счетных камерах

Определение количества клеток микроорганизмов

ЗАНЯТИЕ 8

Рекомендованный материал

1. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. Егоров Н.С. МГУ, М. 1995. Стр. 122-124.

2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. «Спец.литература», С-Петербург. 1998. Стр. 107-110.

3. Медицинская микробиология. Гл. ред. Покровский В.И., Поздеев О.К. «ГЭОТАР Медицина». М., 1999. Стр. 996-1000.

4. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. «Медицина», М. 1983. Стр. 124-132.

5. Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии. «Колос», М. 1972. Стр.23-26.

ТЕМА: Количественный учет микроорганизмов.

Вопросы для рассмотрения:

1. Подсчет клеток в счетных камерах.

2. Подсчет клеток в капиллярах Перфильева.

3. Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках (метод Виноградского-Брида).

4. Подсчет клеток на мембранных фильтрах.

5. Определение количества клеток высевом на плотные питательные среды (чашечный метод Кока).

6. Определение количества клеток высевом в жидкие среды (метод предельных разведений).

7. Определение биомассы взвешиванием.

8. Определение количества клеток и биомассы нефелометрическим методом.

Задание для выполнения лабораторной работы.

1. Подсчитать клетки на фиксированных окрашенных мазках (по методу Виноградского-Брида). Вычислить количество клеток микроорганизмов, содержащихся в 1 мл.

2. Сделать подсчет выросших колоний по чашечному методу Коха. Вычислить количество клеток в 1 мл воды (1л), почвенной суспензии, в 1м³ воздуха, в 1г воздушно-сухой почвы, в 1г абсолютно сухой почвы.

3. Подсчитать количество клеток микроорганизмов в 1 мл суспензии в камере Горяева.

а x 10³

М = ————— n

h x S

М — число клеток в 1мл суспензии

а — среднее число клеток в квадрате сетки

h — высота камеры в мм

S — площадь квадрата сетки в мм²

10³ — коэффициент перевода см³ в мм³

n — разведение исследуемой суспензии

a x 10³

М = ———————— n

h x L x d

М — число клеток в 1 мл исследуемого субстрата

а —- среднее число клеток в капилляре, длиной в диаметр поля зрения

h — высота капилляра в мм

L — ширина капилляра в мм

d —- диаметр поля зрения (длина капилляра) при данном увеличении микроскопа, в мм

10³ — коэффициент перевода см³ в мм³

n — разведение исследуемого субстрата

a x S

М= —————— n

s x V

М — число клеток в 1 мл исследуемого субстрата

а — среднее число клеток в квадрате окулярной сетки

(поля зрения), мкм²

V — объем нанесенной на стекло суспензии в мл

S — площадь приготовленного мазка в мкм²

s --- площадь квадрата окулярной сетки поля зрения), мкм²

n — разведение исследуемого субстрата

a x F x 10³

М = ---------------------------,

V x s

М — количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата

а — среднее количество клеток в квадрате окулярной

сетки (поле зрения)

F — площадь мембранного фильтра в мм²

V — объем (мл) профильтрованной жидкости

10⁶ — коэффициент перевода мм² в мкм²

s — площадь квадрата окулярной сетки (поля зрения)

Дата добавления: 2014-12-10