Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Доказательства полуконсервативной репликации ДНК (опыты Мезельсон и Сталь)




Доказательства роли ДНК в наследственности (опыты Грффитса; Мак-Леода, Мак-Картни и Эвери; Херши и Чейза).

1868 г. – открытие ДНК.

Первые доказательства - Гриффит – 1928 г., который обнаружил явление трансформации при изучении пневмококковых инфекций у мышей. S-штамм обладает гладкой капсулой и является вирулентным. R-штамм не вызывает гибели. Если S-штамм нагреть и ввести мышам, то они выживают. Но он взял и смешал R и S и обработал температурой (R+S+t → гибель). При исследовании тканей погибших мышей, он обнаружил гладкие капсульные формы. Вывод: какой-то компонент мертвых бактерий способен трансформировать бескапсулярные формы, после чего они способны синтезировать полисахаридную капсулу. Природу вещества он не видел. В 1944 г. Эвери, Маккарти и др. сделали это. Они все повторили in vitro и обработали бескапсульные штаммы экспериментальными ДНК и получили тот же эффект. Они обрабатывали протеазами, рибонуклеазами, ДНК-азами. И только с ДНК-азами экстракт терял способность к превращению бескапсулярных в капсулярные формы. Таким образом, было установлено, что именно ДНК, выделенные из бактерий, несущие ген каждого полисахарида могут переносить ген в капсулярные бактерии.

1952 г. – получена еще одна группа доказательств Херши и Чейза. Они работали с бактериофагами. Они инфицировали бактерию E. Coli с фагом Т2, которые были помечены ДНК (Р32) и оболочка была помечена серой (S35). Через какое-то время культуру встряхивали и разделяли. Обнаружили, что весь Р32 находится внутри бактерии E. Coli. S35 осталась в питательной среде, где выращивались бактерии. Далее смотрели потомства. Оказалось, что фаговые частицы содержали 30% Р и 1% фосфора. Позже удалось найти бактерию чистой фазовой ДНК. Это доказало, что ген – материал, содержащийся в ДНК.

Присоединение идет в 3’-гидроксильный конец. Пространственная конфигурация была установлена в 1953 году на основе рентгеноструктурных данных Уилкинсона. ДНК представляет собой двойную спираль, их соединение обеспечивается азотистыми основаниями, между которыми возникают водородные связи, причем спаривание оснований идет строго определенным образом. Витки спирали закручены по часовой стрелке. В результате образуется суперспираль. Они предположили, что цепи ДНК способны к раскручиванию, последующему разделению. Образовавшиеся молекулы служат матрицей к которой присоединяется соответствующий нуклеотид. Такой способ называют консервативным.

Полуконсервативный тип репликации ДНК был подтвержден Мезельсоном и Сталем. Они выращивали E. Coli в минеральной среде, причем азот получали только из хлористого аммония, содержащий азот – N15. Поэтому все пуриновые и пиримидиновые соединения азота и вся ДНК тоже была тяжелая. Затем бактерии выделяли из культуры и переносили на обычную среду, содержащую N14, и после 1-2 циклов репликации снова отмывали и центрифугировали в градиенте хлористого цезия. Таким образом, было доказано, что синтез ДНК – полуконсервативный способ.

В связи со сложной структурой хромосом возникает вопрос о репликации ДНК.

 




Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2015-04-24; Просмотров: 2857; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.012 сек.