Учет мутаций у микроорганизмов (метод реплик)

Учет мутаций у микроорганизмов чаще всего проводится методом реплик или отпечатков. Этот метод удобно использовать, так как все гены в единственном числе и мутации проявляются сразу. Метод обнаружения биохимических мутаций у микроорганизмов предложили Бидл и Татум. Выделение клеток с биохимическими мутациями, вызывающие утрату способности к синтезу каких-либо веществ (витаминов, аминокислот) производят путем проверки способности микроорганизмов расти на минимальной среде (только соли и сахара). Микроорганизмы, растущие на ней – прототрофы. Если микроорганизм теряет способность синтезировать какое-либо вещество за счет мутаций, то необходимо это вещество добавить в среду. Такие микроорганизмы – ауксотрофы.

Выделение мутантных клонов (не способных синтезировать какие-то вещества). Сначала смесь клеток засевают на полную среду. Затем из каждой колонии засевают на минимальную и полную. На минимальной среде будут прототрофы, на полной разовьются все. Сравниваем клоны и выявляем те, которые не растут на минимальной среде. Далее необходимо определить какого биохимического вещества не хватает.

Ледерберг предложил усовершенствовать этот метод. Клетки микроорганизмов засевают на плотную агаровую среду в чашках Петри, чтобы образовались отдельные колонии. Далее с помощью бархатной перчатки колонии переносят на чашки с минимальной средой, полной и любыми другими средами. Затем колонии сравнивают и отмечают те, которые не выросли на минимальной.

Дата добавления: 2015-04-24