Метод Меллер-5 (М-5)

Наиболее удобные методы учета мутаций разработаны для дрозофилы (D. melanogaster). Собственно именно создание мето­дов учета рецессивных летальных мутаций в Х-хромосоме опре­делило успех Г. Меллера, открывшего действие рентгеновых лучей на мутационный процесс у дрозофилы. Для учета рецессив­ных летальных мутаций, сцепленных с полом, у дрозофилы ши­роко применяют метод Меллер-5. Самки линии Меллер-5, или М-5, несут в обеих Х-хромосомах по две инверсии: sc⁸ и δ 49. Инверсия sc⁸ захватывает почти всю Х-хромосому, а в ее пределах находится еще одна инверсия - δ 49. В этой системе кроссинговер полностью подавлен. Используемые инверсии не име­ют рецессивного летального действия. Кроме того, обе хромосомы М-5 несут три маркера: два рецессивных — w^а (абрикосовый цвет глаз) и sc⁸ (укороченные щетинки – фенотипическое проявление одноименной инверсии, затрагивающей ген sc) и один доминант­ный – Bar .

При скрещивании исследуемых самцов с самками М-5 в инди­видуальных семьях F₂, получают по два класса самок и самцов, ес­ли в Х-хромосоме сперматозоидов исходного самца не возникла рецессивная летальная мутация (рис А). Если же рецессив­ная леталь появилась, то в соответствующей индивидуальной культуре в F₂ мы получим только один класс самцов (рис Б), будут отсутствовать самцы дикого типа w⁺ В⁺.

40.Метод CyL/Ptn

Учет летальных мутаций и мутаций с видимым фенотипическим проявлением легче удается для Х-хромосом дрозофилы бла­годаря специфике ее наследования. Однако существуют методы учета летальных мутаций в аутосомах. Например, для учета ре­цессивных летальных мутаций в хромосоме 2 используют так на­зываемый метод сбалансированных леталей. Для этого применяют линию, гетерозиготную по хромосоме 2. В одном гомологе нахо­дятся доминантные гены Cyrly (Су — загнутые крылья) и Lobe (L — уменьшенные глаза лопастной формы), в другом гомоло­ге - Plum (Pm — сливово-коричневый цвет глаз). Кроме того, хромосома Су L содержит инверсии, препятствующие кроссинго­веру. Все три доминантные мутации обладают рецессивным леталь­ным действием. Благодаря этому при разведении такой линии выживают только гетерозиготы по указанным генам. Это и есть система сбалансированных леталей.

Для изучения рецессивных летальных мутаций, а также ре­цессивных мутаций с видимым проявлением исследуемых мух скрещивают с мухами CyL/Pm. В F₁ получают мух, гетерозигот­ных по той или другой хромосоме исследуемой линии, и инди­видуально вновь скрещивают сегрегантов (обладатель мутантного аллеля от родителя) CyL с мухами CyL/Pm. В F₂ (в индивидуальных культурах) скрещивают между собой самцов и самок с признаками CyL и анализируют F₃. В отсутствие рецессивной летальной мутации расщепление в F₃ бу­дет 2CyL: 1Cy⁺L⁺(рис А), а если в половых клетках мух исходной линии возникали летальные мутации, то в соответствую­щих индивидуальных культурах в F₃ не будет нормальных мух 2CyL: 0 Су⁺L⁺ (рис Б). Аналогично учитывают в F₃ и рецессивные мутации с видимым проявлением в хромосоме 2.

Дата добавления: 2015-04-24