Открытие дегидрогеназы янтарной кислоты в мышцах

Дегидрогеназа янтарной кислоты относится к анаэробным дегидрогеназам. Анаэробные дегидрогеназы переносят водород от окисляемого вещества на другое, но не на кислород. В состав простейшей группировки дегидрогеназ нередко входят витамины. Дегидрогеназа янтарной кислоты имеет название сукцинатдегидрогеназа.

Ход работы. В 2 пробирки приливают по 1 мл дистиллированной воды и в каждую помещают по 100 мг мышечной кашицы, предварительно промытой водой. В первую пробирку приливают 2 мл 0,1 Н раствора янтарной кислоты, во вторую 2 мл дистиллированной воды. В каждую пробирку добавляют по 2 капли 0,02% раствора метиленовой сини, перемешивают содержимое и заливают 3-5 каплями растительного масла. Обе пробирки помещают в термостат или водяную баню на 30 минут, после чего наблюдают окрашивание.

Определение молочной кислоты в мышцах

Ход работы. Мышцу животного 1г растирают в ступке с толченым песком, добавляют 2-3 мл дистиллированной воды, фильтруют. С фильтратом проделывают качественную реакцию на молочную кислоту с реактивом Уфельмана (10 капель 1% раствора FeCl₃ и 10 капель фенола), наблюдают переход окраски от фиолетовой к желто-зеленой, что говорит о присутствии промежуточного продукта расщепления глюкозы - молочной кислоты.

Клинико-диагностическое значение: реакция Уфельмана позволяет обнаружить присутствие лактата в любой биологической жидкости (например, в желудочном соке).

Нитропруссидная реакция (реакция Вейля) на креатинин

При добавлении нитропруссида натрия (Na₂Fe(CN)₅NO) к щелочному раствору креатинина жидкость приобретает красную окраску, быстро исчезающую, особенно после добавления уксусной кислоты. Реакция обусловлена образованием нестойкого нитрозокреатинина.

Ход работы. К 10 каплям мочи прибавляют 1 каплю 5%-го свежеприготовленного раствора нитропруссида натрия и 1 каплю 10%-го раствора гидроксида натрия. Моча окрашивается в красный цвет, быстро переходящий в желтый.

Дата добавления: 2015-07-02