Количественное определение креатинина в моче

При нагревании в мышцах из креатинфосфата образуется его альдегид – креатинин. Наибольшее количество креатинина образуется в мышцах при дефосфорилировании креатинфосфата.

В основе обнаружения и количественного определения креатинина положена цветная реакция креатинина в щелочной среде с пикриновой кислотой, в результате которой образуется окрашенный в оранжевый цвет пикрат креатинина.

По интенсивности окрашивания, определяемой колориметрически, контрольно (стандартный раствор бихромата калия) и иcследуемой смеси проб, можно расcчитать массовую концентрацию креатинина в исследуемой смеси.

Ход работы. В пробирку наливают 0,1 мл исследуемой мочи, прибавляют 0,1мл 10% раствора гидроксида натрия и оставляют стоять на 5 минут. Затем добавляют 0,15 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты, взбалтывают и оставляют стоять 5 минут. Затем доводят объем до 10 мл дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Измеряют светопоглощение опытной пробы против контрольной на ФЭК-е при 490 нм (зеленый светофильтр №5) в кювете с толщиной слоя 0,3. Контрольную пробу готовят как опытную, только вместо мочи берут равный объем дистиллированной воды.

Расчет: С₁ = Д₁Q/Д₂V,

где Д₁ и Д₂ – значение оптических плотностей стандартного раствора бихромата калия и соответственно исследуемого раствора; Q - масса креатинина в 250 мл раствора, эквивалентная по окраске 1% стандартному р-ру бихромата калия (2,5); V – объем мочи, взятой для анализа.

10 мл раствора – 0,1 мг соответственно креатинина, норма – 9-18 ммоль/сутки.

Контрольные вопросы

1. Химический состав мышечной ткани.

2. Строение и функции миоглобина.

3. С чем связана АТФ-азная активность миозина?

4. Перечислить важнейшие функции миозина.

5. Пространственная организация молекулы актина.

6. Механизм процесса агрегации актина.

7. Механизм образования актомиозинового комплекса.

8. Пространственная организация молекулы тропомиозина.

9. Пространственная организация регуляторного белка - тропонина. Роль отдельных субъединиц тропонина в регуляции мышечного сокращения.

10. Роль кальция в регуляции мышечного сокращения.

11. Из каких последовательных процессов складывается мышечное сокращение?

12. За счет каких механизмов происходит уменьшение концентрации кальция в саркоплазме?

13. Перечислить основные источники энергии мышечной ткани.

14. Роль креатинфосфокиназной системы в процессе мышечного сокращения. Написать уравнение реакции, катализируемой креатинфосфокиназой.

15. Какие энергетические системы относятся к "быстрым" резервам и как осуществляется их взаимосвязь?

16. За счет каких источников покрываются энергетические затраты в покоящейся мышце?

17. За счет каких процессов обеспечивается энергией работающая мышца?

18. В чем причина накопления молочной кислоты в мышечной ткани?

19. Пути утилизации молочной кислоты в условиях покоя.

20. Направленность метаболистических процессов в мышечной ткани в состоянии покоя, в условиях интенсивной работы.

21. Роль карнозина и анзерина в мышечном сокращении.

22. Чем объясняется усиление биосинтеза мочевины в печени в период мышечной работы?

23. В чем заключается эндокринная функция миокарда?

Дата добавления: 2015-07-02