Порядок выполнения работы. Подготовка образцов к исследованию

Подготовка образцов к исследованию. При количественных и качественных исследованиях продуктов очень большое значение имеет способ гомогенизации (измельчения) образца твердых и жидких неоднородных продуктов.

В России для этого применяют ступку, пестик и стерильный кварцевый песок, В Германии – стеклянные бусинки, в США, Канаде, Англии, Польше – электрические стерильные гомогенизаторы (микроизмельчители). Для приготовления исходной взвеси продукта можно использовать стерильную воду, фосфатный буфер, физиологический раствор, 0,1% пептонную воду, триптиказосоевый бульон. При сравнительных исследованиях используют для приготовления взвеси питательный бульон (0,5% пептона, 0,25% дрожжевого экстракта, 0,1% декстрозы, рН 7). В этом случае микроорганизмов вырастает в 10 раз больше, чем при разведении гомогенатов дистиллированной водой. Далее готовят серийные разведения в зависимости от предполагаемой обсемененности продукта, высевают материал поверхностным методом при помощи шпателя Дригальского на чашки с застывшим триптоноглюкозным агаром, питательным агаром (РПА, МПА), Oxoid СМЗ. Для исследования креветок и крабов берут навеску 50 г, для исследования моллюсков – 10 г. Для удаления ила, песка и других частиц образцы промывают в растворе Рингера (NaCl -9 г, KCl - 0,42 г, CaCl₂ ангидрид 0,48 г, бикарбонат натрия -0,2 г на 1000 мл воды, рН 7). Раствор стерилизуют при температуре 121⁰С в течение 10 мин. Для работы берут 1 часть раствора и 3 части дистиллированной воды.

При исследовании моллюсков после промывки в растворе Рингера и в проточной воде створки открывают при помощи стальных щипцов или пинцетов. Тело моллюсков вместе с окружающей жидкостью переносят в стерильную ступку, нарезают на мелкие кусочки и перемешивают со стерильным песком. Затем содержимое ступки переносят в стерильную колбу (стерильную бутылочку) с физиологическим раствором, взбалтывают и оставляют на 10 мин при комнатной температуре для осаждения. Для посева отбирают верхний слой раствора. В России отбор проб и подготовку образцов к анализу осуществляют согласно «Методической инструкции по санитарно-микробиологическому контролю производства кулинарных изделий из рыбы и нерыбных объектов морского промысла», 1978.

При исследовании твердых пищевых продуктов (беспозвоночные) иногда делают смыв с их поверхностей. Стерильным тампоном протирают, или делают соскоб с определенной поверхности продукта, затем материал тщательно суспендируют в стерильной жидкости и после разведения вносят по 1 мл в чашки Петри и заливают расплавленной и охлажденной до 37⁰С питательной средой. При исследовании мелких беспозвоночных в заранее простерилизованную и взвешенную колбочку или банку отбирают 3-4 образца, взвешивают еще раз и по разности масс устанавливают массу навески, делают первое разведение 1:10, тщательно перемешивают и после отстаивания делают соответствующие разведения и посевы.

При исследовании замороженных беспозвоночных рекомендуется вместо гомогената использовать мышечный сок. Результаты, полученные при использовании гомогената и мышечного сока, почти не различаются. От замороженного брикета отбирают около 20 г и помещают в водяную баню (44⁰С) на 10 - 30 минут, отделившийся сок подвергают исследованию. Разведения 1:50 или 1:500 готовят с помощью раствора Рингера (0,25%) и перемешивают 10 секунд. При исследовании мышечного сока отпадает необходимость взвешивать образцы, что дает возможность увеличить количество анализов. Такие бактерии, как E. coli и St. aureus, можно определять как в гомогенатах, так и в соке. Замороженные образцы иногда рекомендуют размораживать медленно в течение ночи до температуры 5-10⁰ С, а затем исследовать.

Дата добавления: 2015-07-02