Исследование нуклеиновых кислот. Методы ДНК-диагностики 4 страница

Индивидуализирующие системы на основе анализа ПДАФ хромосомной ДНК. В настоящее время в мировой судебно-экспертной практике применяется несколько десятков молекулярно-генетических ПДАФ-систем на основе полиморфных локусов.

Наследование аллельных вариантов каждого полиморфного локуса происходит по ядерному типу, то есть примерно половина всех маркерных элементов, составляющих локальный геномный профиль каждого человека, ведет начало от его отца, а другая половина - от матери. Такой характер наследования обусловлен аутосомной локализацией гипервариабельных локусов: каждый аллельный вариант наследуется как простой менделевский кодоминантный признак.

Экспертиза спорного отцовства, по сути, также является идентификационным тестом. Однако в отличие от прямой судебно-медицинской идентификации личности отождествление здесь носит опосредованный характер. Если пользоваться криминалистической терминологией, признаки «образующего» объекта (в данном случае - родительского индивидуума), используемые с целью идентификации, отражаются в «воспринимающем» объекте - ребенке - не непосредственно, как в биологических следах, а преломляются через призму сложных генетических закономерностей. Знание и правильная оценка этих закономерностей необходимы для адекватной интерпретации результатов экспертного исследования.

Идентификационный тест, направленный на разрешение случаев оспариваемого отцовства, предполагает сравнительный анализ геномных профилей ребенка, матери и предполагаемого отца. При этом сначала регистрируют те полосы в геномном отпечатке ребенка, позиции которых совпадают с материнскими полосами, а оставшиеся полосы у ребенка сопоставляют с геномным профилем мужчины. Если исследуемое трио представляет собой истинную биологическую семью, все нематеринские полосы ребенка обнаружатся в геномном профиле отца. В противном же случае часть полос в локальных геномных профилях ребенка окажется «лишними», то есть не найдет соответствия в геномных профилях заявленных родителей. Этот стандартный алгоритм решения данной экспертной задачи базируется на закономерностях наследования гипервариабельных локусов. В частности, опираясь на менделевский кодоминантный характер наследования, можно считать, что все полосы, составляющие геномный профиль ребенка, должны иметь либо отцовское, либо материнское происхождение. Присутствие у ребенка посторонних фрагментов служит основанием для исключения заявленного отцовства (при условии, что материнство рассматривается как бесспорное). В свою очередь, полное комплементарное соответствие геномных профилей ребенка и заявленных родителей означает неисключение заявленного родства.

Индивидуализирующая система на основе анализа ПДАФ митохондриальной ДНК. Особая ценность данного методического подхода обусловлена тем обстоятельством, что в целом ряде случаев для экспертизы могут быть недоступны идентифицирующие объекты, которые позволили бы прямо установить индивидуализирующие признаки погибших на уровне их хромосомной ДНК. Остается возможность только непрямой идентификации, например, путем использования в качестве идентифицирующих объектов биологических образцов, полученных от родственников устанавливаемых лиц. Однако в этих условиях решение судебно-медицинской задачи идентификации с помощью стандартного молекулярно-генетического анализа хромосомных маркеров сталкивается с серьезными трудностями.

Проблема в том, что единственно возможная в таких обстоятельствах схема непрямой, то есть опосредованной через родственников, идентификации дает доказательный результат, если только в качестве индивидуализирующих элементов используется достаточно большое число полиморфных хромосомных локусов. Кроме того, часто приходится анализировать не близкородственную вертикальную схему «родители-дети», а более далекую, например, «дед/бабка-внук» или «дядя/тетка-племянник» либо же горизонтальные схемы типа «брат-сестра» (в отсутствие родителей). В этих случаях речь идет о достаточно отдаленном родстве и о более вариантных схемах наследования ядерных генов-признаков. Когда генетическая дистанция, разделяющая родственников по вертикали, превышает одно поколение, или анализируются горизонтальные схемы родства, верификация родственных связей с помощью анализа одной лишь хромосомной ДНК оказывается проблематичной.

Напротив, типирование митохондриальной ДНК, по существу, позволяет выявлять родственные связи с помощью не близкородственных, а так сказать, трассирующих родословных маркеров. Одним из первых и наиболее ярких примеров использования митохондриальной ДНК в экспертном исследовании стала идентификация останков членов российской императорской семьи. Данная экспертиза положила начало серии работ, основанных на анализе мтДНК и проливающих свет на исторические события прошлого.

Такова, например, экспертиза предполагаемых останков нацистского преступника Мартина Бормана. На протяжении многих лет была распространена легенда о том, что Борману удалось остаться в живых и после окончания войны покинуть Германию. В 1972 г. в ходе строительных работ были обнаружены костные останки, которые по ряду косвенных признаков могли принадлежать Борману. Для окончательного пресечения спекуляций было проведено исследование мтДНК костных останков, которое выявило полное совпадение с мтДНК ныне живущих матрилинейных родственников Бормана. Такое совпадение с большой вероятностью подтвердило принадлежность костных останков исторической фигуре.

К событиям более далекого прошлого относится экспертиза предполагаемых останков принца Луи XVII. Согласно официальной истории, 10-летний сын Луи XVI и Марии-Антуанетты умер в парижской тюрьме в 1795 г. Однако многочисленные слухи свидетельствовали о чудесном спасении принца. Обнаружились даже люди, объявившие себя спасенным Луи XVII. Одним из них был Карл Вильгельм Наундорф, похороненный в 1845 г. в Нидерландах как Луи XVII. Для выяснения исторической истины был проведен сравнительный анализ мтДНК останков Наундорфа и ныне живущих родственников Марии-Антуанетты и параллельно - анализ мтДНК сохранившегося сердца мальчика, скончавшегося в 1795 г. в парижской тюрьме. Исследование исключило родство Наундорфа с родственниками Марии-Антуанетты (а, следовательно, и его права наследника), поскольку выявило различия в их мтДНК, и установило совпадение нуклеотидных последовательностей мтДНК сердца и матрилинейных родственников Луи XVII, тем самым подтвердив официальную версию исторических событий.

Дата добавления: 2014-11-29