Изучение культур

1. Из элективных культур изготовить прижизненные препараты «раздавленная капля», изучить, пользуясь объективом х 40.

2. Изготовить фиксированные окрашенные препараты, промикроскопировать с иммерсионной системой.

3. Изготовить препарат «раздавленная капля» из ила серного источника, тщательно изучить под микроскопом.

4. Выполнить рисунки препаратов.

рецепты некоторых красителей, индикаторов

и растворов

1. Насыщенный раствор метиленовой синей.

3 г метиленовой синей растворяют в 100 мл 96-процентного спирта. Настаивают в течение 2-3 дней, периодически встряхивая. Фильтруют. Раствор может храниться длительное время.

2. Раствор метиленовой синей (1:40).

Готовят непосредственно перед употреблением. 1 мл насыщенного раствора + 40 мл дистиллированной воды.

3. Метиленовая синяя по Лёффлеру.

К 100 мл дистиллированной воды прибавляют 300 мл насыщенного спиртового раствора метиленовой синей и 1 мл однопроцентного раствора КОН. Раствор устойчив.

4. Насыщенный спиртовой раствор фуксина основного.

10 г сухого красителя растворяют в 100 мл 96-процентного спирта. Раствор устойчив.

5. Раствор фуксина 1:10.

К 90 мл дистиллированной воды добавляют 10 мл насыщенного раствора фуксина. Водный раствор нестоек, поэтому его готовят непосредственно перед употреблением.

6. Раствор фуксина для окрашивания прижизненных препаратов.

К 100 мл дистиллированной воды добавляют 1 мл насыщенного спиртового раствора фуксина.

7. Карболовый фуксин Циля.

К 10 мл насыщенного раствора фуксина прибавляют 100 мл 5-процентного раствора фенола (карболовой кислоты). Приготовленную смесь через 48 часов отфильтровывают. Раствор устойчив.

8. Раствор генцианвиолетта.

К 10 мл дистиллированной воды добавляют 1 мл насыщенного спиртового раствора генцианвиолетта.

9. Карболовый генцианвиолетт.

Растворяют 1 г генцианвиолета в 10 мл 96-процентного спирта. Полученный раствор выливают в 100 мл 5-процентного раствора фенола.

10. Карболовый эритрозин.

3 г эритрозина и 5 г фенола растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Смесь отстаивают, а затем ею пользуются для окраски почвенных микроорганизмов.

11. Судан III.

0,5 г красной краски Судан III растворяют в 100 мл 95-процентного спирта.

12. Раствор Люголя в модификации Грама.

В ступку помещают 1 г кристаллического иода и 2 г иодистого калия и растирают смесь пестиком. Добавляют 1 мл дистиллированной воды и, продолжая растирать, добавляют еще 5 мл воды. Раствор переносят в склянку и доводят общий объем до 300 мл. Раствор годен не более 30 дней. Хранить в темной посуде.

13. Раствор Люголя для выявления гликогена и гранулезы.

Для окраски гликогена: 7 г йода, 20 г йодистого калия и 100 мл дистиллированной воды.

Для окраски гранулезы: 1 г йода, 2 г йодистого калия и 100 мл дистиллированной воды. Раствор готовят как указано в пункте 12.

14. Раствор туши.

Жидкую натуральную тушь разводят водопроводной водой в соотношении 1:9, разливают в пробирки и автоклавируют при 0,5 атм. Раствору дают отстояться 2 недели, после чего тушь готова к употреблению.

15. Реактивы для крахмально-иодной пробы на нитриты.

а) 2 г ZnCl₂ растворяют в 10 мл дистиллированной воды, кипятят и добавляют крахмал (0,4 г). Доводят объем до 100 мл и оставляют стоять неделю. Затем раствор фильтруют и добавляют равный объем 0,2-процентного раствора КJ.

б) H₂SO₄ (1 часть концентрированной H₂SO₄ + 3 части дистиллированной воды).

16. Хромовая смесь для мытья посуды.

1-й способ: В концентрированную серную кислоту добавляют около 5% размельченного в порошок кристаллического бихромата калия и осторожно нагревают в фарфоровой чашке на водяной бане до его растворения.

2-й способ: 6 г бихромата калия растворяют в 100 мл воды, затем в раствор осторожно (!) добавляют 100 мл серной кислоты.

17. Раствор дифениламина.

Несколько кристаллов дифениламина растворяют в 1 мл концентрированной серной кислоты.

18. Реактив Несслера.

Раствор хлорида ртути (17 г в 300 мл воды) приливают к раствору йодида калия (35 г в 100 мл воды) до выпадения красного нерастворимого осадка. Объем полученной жидкости доводят до 1 л, добавляя 20-процентного раствор ОН. Если при этом осадок растворился, то снова добавляют раствор хлорида ртути до получения осадка. Раствор хранят в герметично закрытой склянке.

19. Реактив Несслера для выявления аммиака.

32 г дистиллированной воды, KI (134 г), HgCl₂ (500 мл), KOH (20 г).

20 г KI растворяют в 50 мл дистиллированной воды, к раствору до насыщения добавляют HgCl₂ (около 32 г), далее доливают 460 мл дистиллированной воды и вносят 134 г КОН. Раствор хранят в темной склянке, лучше в холодильнике.

20. Чернила для написания по стеклу.

1 г фуксина основного растворяют в 15 мл спирта. 2 г танина растворяют в 15 мл воды и кипятят. Оба раствора смешивают в равных объемах.

ЛИТЕРАТУРА

1. Аникеев В.В., Лукомская К.А. Руководство к практическим занятиям по микробиологии: Учеб. пособие для студентов биол. спец. пед. ин-тов. – 2-е изд. – М.: Просв., 1983.

2. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. – М.: Изд-во МГУ, 1978.

3. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. – 4-е изд. – М.: Медицина, 1978.

4. Лерина И.В., Педенко А.И. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии: Учеб. пособие для товаровед. и технолог. фак. торг. вузов. – М.: Экономика, 1980.

5. Лукомская К.А. Микробиология с основами вирусологии: Учеб. пособие для пед. ин-тов. – М.: Просв., 1987.

6. Петрова Е.И. Микробиология: Учеб. метод. пособие. – Череповец: ЧГУ., 2001.

7. Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии: Учебное пособие для вузов/под ред. В.К. Шильниковой. – 5-е изд., перераб. и доп. – М.:Дрофа, 2004.

8. Шлегель Г. Общая микробиология/ Пер. с нем. – М.: Мир, 1987.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение………………………………………………………………………………….	3
Правила работы и поведения в лаборатории…………………………………….	3
Список необходимого оборудования………………………………………………..	4
Порядок выполнения работ и оформления лабораторного журнала……….	5
Тема 1. Техника микроскопирования……………………………………………….	6
Тема 2. Приготовление препаратов микроорганизмов. Прижизненное изучение микроорганизмов……………………………………………………………….	9
Тема 3. Питательные среды, их приготовление, разливка. Получение элективных культур……………………………………………………………………….	11
Тема 4. Экология микроорганизмов. Основы санитарно-бактериологического анализа…………………………………………………………...	12
Тема 5. Получение чистых культур. Изучение особенностей микроорганизмов с целью их идентификации……………………………………………………..	16
Тема 6. Изучение ветвящихся и образующих плодовые тела форм бактерий методом элективных культур……………………………………………………..	22
Тема 7. Трансформация микроорганизмами соединений азота……………...	26
Тема 8. Участие микроорганизмов в круговороте углерода………………….	32
Тема 9. Трансформация микроорганизмами соединений серы………………..	34
Рецепты некоторых красителей, индикаторов и растворов………………...	36
Литература……………………………………………………………………………...	39

Дата добавления: 2014-12-17