Определение холестерина в ЛПВП, ЛПНП и лпонп. Расчет индекса атерогенности

Клинико-диагностическое значение метода.

Для выявление атеросклероза или прогнозирования вероятности его развития чаще всего бывает недостаточно определения уровня холестерина b-липопротеидов в крови пациентов. Особую диагностическую ценность здесь имеет расчет индекса атерогенности, который в норме у здоровых людей варьирует в пределах 2-4.

,

ПРИНЦИП МЕТОДА основан на осаждении ЛПНП и ЛПОНП раствором МgСl₂ на 4% фосфорно-вольфрамовой кислоте и определении содержания ХС в цельной сыворотке крови и фракции ЛПВП. По разности рассчитывают содержание ХС в объединенной фракции ЛПНП и ЛПОНП.

ХОД РАБОТЫ.

1) К 1,0 мл сыворотки крови прилить 0,1 мл 0,5 М МgCl₂ на 4% водном растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты.

2) Инкубировать в течение 30 мин при 4⁰С (в холодильнике) с целью полного выпадения в осадок ЛПНП и ЛПОНП.

3) Центрифугировать пробу в течение 15 мин при 3000 об/мин.

4) В полученном супернатанте определить ЛПВП-ХС, а в цельной сыворотке общий ХС. По разности рассчитать содержание ХС во фракции ЛПНП +ЛПОНП.

Клинико-диагностическое значение. Повышение коэффициента наблюдается при гипертонической болезни, даже в начальных стадиях, ишемической болезни сердца (ИБС), всех формах и стадиях атеросклероза.

Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

1. Молекула холестерола легко встраивается в бислой мембраны. Существует механизм защиты клеток от избытка ХС. Это реакция его этерификации. Образованный продукт не удерживается в мембране. Как изменится содержание ХС в бислое при снижении активности этого фермента? Для решения задачи:

а) напишите схему реакции этерификации ХС, укажите фермент;

б) укажите, какие изменения в структуре мембран наблюдаются при этом нарушении;

в) объясните, как повышение содержания ХС будет влиять на функционирование белков мембраны.

Дата добавления: 2014-12-27