Выявление неклеточных структур соединительной ткани

Окраска железным гематоксилином по методу Генденгайна

Техника окраски гематоксилин-эозином

Характеристики гематоксилина и эозина

Гематоксилин - гистологический краситель, окрашивающий базофильные клеточные структуры (хроматин ядер, ядрышко и др.) в ярко-синий цвет.

Эозин - кислый краситель, окрашивающий белки, различные структуры цитоплазмы, некоторые клетки крови (эозинофилы) в ярко-розовый цвет.

1. Удаляют парафин из срезов в орто-ксилоле или толуоле, проводят по спиртам нисходящей концентрации и доводят до воды (две порции ксилола или толуола – 3-5 минут, 96° этанол – 3 минуты, 80° этанол – 3 минуты, 70° этанол – 3 минуты, дистиллированная вода – 5 минут).

2. Окрашивают гематоксилином 7-10 минут (в зависимости от зрелости красителя).

3. Промывают в дистиллированной воде – 5 минут.

4. Дифференцируют в 1% соляной кислоты на 70° этаноле до побурения срезов.

5. Промывают дистиллированной водой, а затем слабым (0,5 %) раствором аммиака до посинения срезов.

6. Окрашивают водным раствором эозина 0,5-1 минуту (в зависимости от желаемой окраски).

7. Промывают в трех порциях дистиллированной воды для удаления избытка эозина.

8. Удаляют воду из срезов в одной порции 70° этанола, двух порциях 96° этанола. Экспозиция в каждой порции спирта – 2 минуты.

9. Просветляют срезы в двух порциях карбол-ксилола (смесь расплавленного фенола и ксилола либо толуола в соотношении 1:4 или 1:5) – 1 минута.

10. Производят окончательное обезвоживание срезов в двух порциях ксилола или толуола. Прибывание срезов 2 минуты.

11. Заключить срезы в канадский бальзам или синтетическую среду для заключения гистологических срезов.

Препарат предварительно обрабатывают железноаммиачными квасцами, а потом обрабатывают гематоксилином. Структуры приобретают коричнево-серый цвет. Хорошо выявляются структуры ядра, границы клеток, мышечные волокна.

1. Окраска по методу ван Гизона. Краситель - смесь растворов пикриновой кислоты и кислого фуксина. Коллагеновые волокна (содержащиеся в межклеточном веществе соединительной ткани) окрашиваются в ярко-красный цвет, а элементы других тканей (напр., мышечные волокна) - в жёлтый цвет.

2. Окраска по методу Маллори. Краситель является трёхцветным: это смесь кислого фуксина, анилинового синего, оранжевогo G, а также двух кислот. Коллагеновые волокна соединительной ткани окрашиваются в тёмно-синий цвет; многие другие структуры (ядра, мышечные волокна, эритроциты) - в оранжевый или красный цвет.

3. Импрегнация серебром. Препарат обрабатывают аммиачным раствором серебра, а затем - восстановителями. В итоге, выделяющееся серебро осаждается на определённых волокнах соединительной ткани. Ретикулярные (аргирофильные) волокна приобретают чёрный цвет, коллагеновые волокна - коричневый, ядра клеток - светло-коричневый.

4. Окраска орсеином. Эластические волокна соединительной ткани окрашиваются в тёмно-красный цвет; остальные структуры - в слабо-розовый цвет.

5. Окраска гематоксилин-пикрофуксином. Эластические волокна окрашиваются пикриновой кислотой в жёлтый цвет, коллагеновые волокна - в красный цвет, ядра клеток - окрашиваются гематоксилином в тёмно-фиолетовый цвет.

6. Окраска по методу Шморля. Используется для окраски костей и дентина. Предварительно кусочки материала подвергают декальцинации (с помощью кислоты), а затем выдерживают в растворе алюмокалиевых квасцов. Краситель - раствор тионина. Стенки костных полостей и канальцев (выстланные сетью коллагеновых волокон) окрашиваются в тёмно-коричневый цвет; остальной фон - светло-коричневый.

Дата добавления: 2015-04-30