Водорастворимые витамины

КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 18

Ц е л ь р а б о т ы - изучить качественные реакции на отдельные витамины.

Качественные реакции на витамин В₁

1. Диазореакция на тиамин

Качественной реакцией на витамин В₁ является диазореакция. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого или красного цвета (азокраситель):

O

||

H₂N- - S = O + NaNO₂ + HCl

|

OH

Сульфаниловая кислота

O

N = N - - - S = O + NaCl + 2H₂O

O

Диазобензосульфокислота

(диазокраситель)

Диазобензосульфокислота + тиамин азокраситель красного или оранжевого цвета.

Диазобензосульфокислота - неустойчивый диазореактив, поэтому диазореактив готовится непосредственно перед применением путем смешивания равных объемов 1%-го раствора сульфаниловой кислоты в 2%-м растворе соляной кислоты и 5%-го раствора нитрита натрия.

Оборудование, реактивы, матералы:

Пробирки; тиамин (5%-й раствор); кислота сульфаниловая (1%-й раствор); нитрит натрия (5-%-й раствор); бикарбонат натрия (10%-й раствор).

Порядок выполнения работы

Для приготовления свежеприготовленного диазореактива в пробирку вносят 1 мл 1%-го раствора сульфаниловой кислоты в 2%-м растворе НСl и 1 мл 5%-го раствора нитрита натрия.

Затем добавляют 1 мл 5%-го раствора тиамина. По стенке, наклонив пробирку, осторожно наслаивают 2 мл 10%-го раствора бикарбоната натрия NaHCO₃. На границе двух жидкостей появляется кольцо

красного или оранжевого цвета, которое через 2-3 мин становится ярко выраженным.

2. Реакция окисления тиамина феррицианидом калия до тиохрома.

Качественной реакцией на тиамин является реакция окисления феррицианидом калия. В щелочной среде тиамин окисляется в тиохром феррицианидом калия K₃[Fe(CN)₆]. Тиохром является желтым пигментом, обладает синей флюоресценцией при ультрафиолетовом облучении раствора на флюороскопе.

Схема реакции следующая:

Тиамин + 2 K₃[Fe(CN)₆] + 3KOH

N N H

CH₃ + 2 K₄[Fe(CN)₆] +

+ KCl + H₂O

H₃C - C

H

N N S

Тиохром

Оборудование, реактивы, материалы:

Флюороскоп; гидроксид натрия (10%-й раствор); феррицианид калия (5%-й раствор); тиамин (5%-й раствор).

Порядок выполнения работы

К одной капле 5%-го раствора тиамина прибавляют 5-10 капель 10%-го раствора гидроксида натрия, 1-2 капли 5%-го раствора феррицианида калия и взбалтывают - наблюдается желтое окрашивание. Прогрев флюороскоп в течение 10 мин наблюдают синюю флюоресценцию при облучении раствора ультрафиолетовыми лучами.

Качественные реакции на витамин В₂ (рибофлавин)

1. Восстановление рибофлавина

Рибофлавин легко окисляется и восстанавливается, отдавая или присоединяя водород к атомам азота изоаллоксазиновой группы в 1-м и 10-м положениях.

При взаимодействии раствора рибофлавина с металлическим цинком и концентрированной соляной кислотой образуется восстановленная форма - лейкофлавин: CH₂(CHOH)₃CH₂OH

N N

H₃C

+ 2HCl + Zn

H₃C

N ||

O

Рибофлавин желто-красный

раствор)

N NH O

H₃C //

ZnCl₂ +

H₃C NH

NH ||

O

Лейкофлавин (бесцветный раствор)

Оборудование, реактивы, материалы:

Пробирки; пипетки; рибофлавин; кислота соляная (конц.); цинк (металлический).

Порядок выполнения работы

В пробирку наливают 1,5 мл 0,025%-го раствора рибофлавина и 1 мл концентрированной соляной кислоты, а затем опускают кусочек металлического цинка. Наблюдается бурное выделение пузырьков водорода и постепенное окрашивание раствора в розовый цвет, далее жидкость обесцвечивается. Если красное окрашивание не исчезает, необходимо добавить зернышко металлического цинка.

2. Реакция с нитратом серебра AgNO₃

Нейтральный или слабокислый растворы рибофлавина (рН = 6,5-7,2), реагируя с азотнокислым серебром, образуют промежуточный продукт восстановления розового или красного цвета - родофлавин.

Оборудование, реактивы, материалы:

Пробирки; пипетки; рибофлавин (0,015%-й раствор); серебро азотнокислое (0,6%-й раствор).

Порядок выполнения работы

К 1 мл раствора рибофлавина добавляют 0,5 мл раствора нитрата серебра. В результате образования родофлавина появляется розовое или красное окрашивание.

Качественная реакция на витамин В₅ (ниацин, никотиновая кислота, никотинамид)

При нагревании никотиновой кислоты с растворами уксусной кислоты и ацетата меди образуется синий осадок медной соли никотиновой кислоты:

Cu

СОО

Никотинад меди

2

N

Оборудование, реактивы, материалы:

Пробирки; пипетки; витамин В₅; кислота уксусная (10%-й раствор); ацетат меди (5%-й раствор).

Порядок выполнения работы

В пробирку помещают 5-10 г витамина В_5, добавляют 1,5 мл 10%-го раствора уксусной кислоты. Нагревают до кипения. Далее к горячему раствору добавляют 1,5 мл 5%-го раствора ацетата меди. Раствор приобретает голубую окраску, мутнеет; при стоянии наблюдается выпадение синего осадка.

Качественная реакция на витамин В₆

При добавлении к раствору пиридоксина раствора хлорного железа образуется комплексное соединение типа фенолята железа, придающее раствору красное окрашивание.

Оборудование, реактивы, материалы:

Пробирки; пипетки; пиридоксин (5%-й раствор); железо хлорное (5%-й раствор).

Порядок выполнения работы

В чистую пробирку наливают 2,5 мл 5%-го раствора пиридоксина, добавляют 0,5 мл 5%-го раствора хлорида железа (Ш). Пробирку встряхивают. Жидкость приобретает красный цвет.

Качественные реакции на витамин В₆

При добавлении к раствору пиридоксина раствора хлорного железа образуется комплексное соединение типа фенолята железа, придающее раствору красное окрашивание.

Оборудование, реактивы, материалы:

Пробирки; пипетки; пиридоксин (5%-й раствор); железо хлорное (5%-й раствор).

Порядок выполнения работы

В чистую пробирку наливают 2,5 мл 5%-го раствора пиридоксина, добавляют 0,5 мл 5%-го раствора хлорида железа (Ш). Пробирку встряхивают. Жидкость приобретает красный цвет.

Дата добавления: 2015-07-13