Качественные реакции на витамин А

ВИТАМИНЫ

КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА ЖИРОРАСТВОРИМЫЕ

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 22

ПО МЕТОДУ ТИЛЬМАНСА

ВИТАМИНА С В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 21

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ

ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С 2,6-ДИХЛОРФЕНОЛИНДОФЕНОЛОМ.

Ц е л ь р а б о т ы - определить содержание витамина С в биологическом материале.

Метод Тильманса основан на взаимодействии аскорбиновой кислоты с

2,6-дихлорфенолиндофенолом с образованием бесцветной лейкоформы

2,6-дихлорфенолиндофенола.

Оборудование, реактивы, материалы:

Центрифуга; пробирки центрифужные; 2,6-дихлорфенолиндофенол (0,001 н раствор); кислота серная (0,3 н раствор); натрий вольфрамовокислый (5%-й раствор); материал биологический (сок капусты, картофеля, вытяжка из шиповника или других плодов).

Порядок выполнения работы

В центрифужную пробирку помещают 2 мл вытяжки из растительных тканей, добавляют 4 мл дистиллированной воды, 2 мл 5%-го раствора вольфрамовокислого натрия. Перемешивают, добавляют 6 мл 0,3 н раствора серной кислоты, снова перемешивают и через 2 мин центрифугруют. Отбирают 5 мл центрифугата и титруют 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола (5 мл центрифугата соответствуют 1 мл исходного раствора витамина С).

Одновременно ставят контрольный опыт, в котором вместо раствора витамина С берут 2 мл воды.

Расчетная формула

Х = (а – в) _* 0,088 _* 100,

m

где Х – содержание витамина С, мг/100 г; а - объем 0,001 н раствора

2,6-дихлорфенолиндофенола, пошедшего на титрование опытной пробы, мл; в - объем 0,01 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола, пошедшего

на титрование контрольной пробы, мл; 0,088 - количество витамина С, соответствующее 1 мл 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола, мг; m - масса вытяжки, г.

Ц е л ь р а б о т ы - изучить качественные реакции на жирорастворимые витамины.

1. Реакция с треххлорной сурьмой

Оборудование, реактивы, материалы:

Жир рыбий; хлороформ; хлори сурьмы (насыщ.)

Порядок выполнения работы

В пробирку наливают 1 мл 20%-го раствора витаминизированного рыбьего жира в хлороформе, прибавляют 1 мл насыщенного раствора хлорида сурьмы. Появляется синее окрашивание, постепенно бледнеющее.

2. Взаимодействие витамина А с сульфатом железа

Оборудование, реактивы, материалы:

Жир рыбий; сульфат железа в уксусной кислоте.

Порядок выполнения работы

В пробирку наливают 0,5 мл рыбьего жира, добавляют 2,5 мл насыщенной сульфатом железа ледяной уксусной кислоты. Появляется голубое окрашивание, постепенно переходящее в розово-красное.

3. Реакция с серной кислотой

Оборудование, реактивы, материалы:

Жир рыбий; кислота серная (конц.).

Порядок выполнения работы

Одну каплю рыбьего жира растворяют в 4-5 каплях хлороформа и прибавляют 1-2 капли концентрированной серной кислоты. Появляется голубое окрашивание, быстро переходящее в красное.

Дата добавления: 2015-07-13