Фотоэлектроколориметрический метод с применением антрона

Этим методом определяют общее содержание сбраживаемых уг­леводов (гексоз) в растворах в присутствии несбраживаемых углево­дов (пентоз) без предварительного гидролиза сложных углеводов, поскольку их гидролиз проходит в процессе реакции с антроновым реактивом.

Определение сахаров с антроном проводится в сильнокислой среде, в результате чего сложные углеводы гидролизуются до глюко­зы и пентоз. Затем эти сахара дегидратируются до оксиметилфурфурола, который при реакции с антроном образует комплексное со­единение сине-зеленого цвета.

Интенсивность образовавшейся окраски измеряют на фотоэлектроколориметре при светофильтрах с длинами световых волн 590 и 400 нм, так как максимумы поглощения света растворов, получен­ных из гексоз и пентоз, различные. Для того чтобы вычислить об­щее содержание сбраживаемых углеводов, получают два значения оптической плотности.

Проведение анализа. Фильтрат бражки разбавляют ди­стиллированной водой с таким расчетом, чтобы в разбавленном ра­створе содержалось от 4 до 10 мг углеводов в 100 см³ раствора, т. е. примерно в 50—100 раз.

В пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 20 см³ на­ливают 5 см³ антронового реактива, затем осторожно по стенке про­бирки приливают 2,5 см³ разбавленного анализируемого раствора так, чтобы жидкости не смешивались, а образовывали два слоя.

Параллельно готовят контрольную пробу, добавляя к 5 см³ ант­ронового реактива 2,5 см³ дистиллированной воды.

Пробирки плотно закрывают пробками, энергично перемеши­вают содержимое пробирок в течение 10 с и погружают в бурнокипящую водяную баню на 6 мин, затем их помещают в баню с про­точной холодной водой и охлаждают до комнатной температуры.

Интенсивность образовавшейся сине-зеленой окраски измеря­ют на фотоэлектроколориметре марки КФК-2 или КФК-3 при све­тофильтрах с λ= 590 нм и λ = 400 нм в кюветах с толщиной погло­щающего свет слоя 5 мм по сравнению с контрольным раствором.

В результате измерения получают два значения оптической плотности D₁ и D₂.

Используя полученные значения оптических плотностей на КФК-2, вычисляют массовую концентрацию сбраживаемых угле­водов (г/100 см³) по формуле:

(10)

где 19,6-постоянный коэффициент, полученный экспериментально;

D₁- оптическая плотность при светофильтре с длиной световой волны 590 нм;

D₂- оптическая плотность при светофильтре с длиной световой волны 400 нм;

n-коэффициент разведения;

1000 – пересчет миллиграммов в граммы.

За результат анализа принимают среднее арифметическое двух параллельных определений, расхождение между которыми не дол­жно превышать +2,5 % относительных.

Вопросы для самоконтроля знаний

1 Основной критерий качества сырья

2 Сравнительная оценка методов определения массовой концентрации углеводов

3 Химические методы определения массовой концентрации сбраживаемых углеводов

4 Перманганатный метод

5 Метод прямого титрования

6 Фотоэлектроколориметрический метод с применением антрона

Дата добавления: 2017-01-13