Лабораторная работа №2

Указания к оформлению лабораторной работы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

V Реакция Сакагучи.

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

1. Раствор яичного белка (1%). 2. Уксусная кислота ледяная. 3. Серная кислота концентрированная.

В пробирку наливают 1 мл раствора белка и 1 мл уксусной кислоты. Осторожно (!) по стенке подслаивают 1 мл концентрированной серной кислоты, Наблюдают появление красно-фиолетового кольца. Записывают химизм реакции.

Реакция Сакагучи открывает в белках аминокислоту аргинин (Arg).

Принцип метода. Аминокислота аргинин и полипептиды, содержащие ее в присутствии щелочи окисляются гипобромитом или гипохлоридом натрия и в присутствии α-нафтола образуют продукт конденсации красного цвета (гуанидиновая группировка). Реакция не является строго специфичной для аргинина. Ее дают и другие монозамещенные гуанидина (метилгуанидин, гликоциамин, агматин и др.), но они отсутствуют в молекуле белка и не мешают определению в белке аргинина.

1. Раствор яичного белка (1%). 2. Гидроскид натрия(10%). 3. Раствор α-нафтола в спирте (0,1%). 4. Раствор гипобромита.

Вносят в пробирку 0,5 мл раствора яичного белка, добавляют 0,5 мл 10% раствора едкого натра, 5 капель 0,1% раствора α-нафтола в спирте и 1-5 капель раствора гипобромита. Появляется розово-красное окрашивание, обусловленное образованием продукта конденсации окисленного аргинина с α-нафтолом.

В тетради для лабораторных работ отметьте цель занятия. Полученные результаты всех цветных реакций необходимо записать в виде таблицы. Химизм каждой цветной реакции записать отдельно.

№ п/п

Название реакции

Ход работы

Наблюдаемая окраска

Определяемая аминокислота (группировка)

Сделайте выводы о специфичности цветных реакций на белки и аминокислоты.

Контрольные вопросы

1. Назовите и напишите аминокислоты, содержащие серу. С помощью какой реакции можно их открыть?

2. Что открывает нингидриновая реакция?

3. Каково значение цветных реакций на белки и аминокислоты?

4. Какие сокращения для аминокислот приняты в биологической химии?

Дата добавления: 2017-02-01