КАТЕГОРИИ:
Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)
Лабораторная работа 6. Определение активности сукцинатдегидрогеназы
|
|
|
|
Описание работы
Приборы и материалы
Термостат
Раствор крахмала
Раствор сахарозы
Раствор сахаразы
Раствор амилазы (раствор слюны)
Нумеруют 4 пробирки. В 1-ую и 2-ю пробирки наливают по 1мл раствора крахмала, в 3-ю и 4-ю пробирки – раствор сахарозы. Затем в 1-ю и 3-ю пробирки вносят по 0,5 мл слюны, а во 2-ю и 4-ю пробирки – по 0,5 мл дрожжевой сахаразы. Раствор перемешивают, инкубируют 10 мин в термостате при 300С. Содержимое пробирок делят на 2 части: с одной частью проделывают реакцию с йодом, а со второй – пробу Троммера.
Результаты работы заносят в таблицу 4.
Таблица 4 – Специфичность действия ферментов
| Исходные вещества и реакции | ||||
| Субстрат | Крахмал | Крахмал | Сахароза | Сахароза |
| Фермент | Амилаза | Сахараза | Амилаза | Сахараза |
| Ферментативная реакция | Есть (нет) | Есть (нет) | Есть (нет) | Есть (нет) |
| Реакция Троммера | Есть (нет) | Есть (нет) | Есть (нет) | Есть (нет) |
| Реакция с йодом | Есть (нет) | Есть (нет) | Есть (нет) | Есть (нет) |
Фермент сукцинатдегидрогеназа относится к классу оксиредуктаз (НФ 1.3.99.1) и катализирует реакцию окисления янтарной кислоты в фумаровую. Восстановленная сукцинатдегидрогеназа передает принятые от янтарной кислоты протоны и электроны в цепь дыхания через убихинон, который выполняет роль промежуточного переносчика. Далее в системе биологического окисления убихинон передает электроны на цитохромы. По химической природе сукцинатдегидрогеназа является металлофлавопротеидом и имеет простетическую группу типа ФАД.
В условиях опыта идет дегидрирование янтарной кислоты в фумаровую, акцептором водорода при этом является метиленовый синий, который восстанавливаясь, превращается в бесцветную лейкоформу:
|
|
|
Критерием активности сукцинатдегидрогеназы является время обесцвечивания метиленового синего в присутствии янтарной кислоты в анаэробных условиях.
Сукцинатдегидрогеназа широко распространена в тканях животных, растений, микроорганизмов. В животных тканях сукцинатдегидрогеназа прочно связана с клеточными структурами и не переходит в раствор при извлечении водой или водно-солевыми растворами.
1 Цель работы – определить активность сукцинатдегидрогеназы
|
|
|
|
|
Дата добавления: 2015-04-24; Просмотров: 3424; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!