Тема: обмен нуклеотидов

ЦЕЛИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать синтез и распад пуринов и пиримидинов

2. Знать механизмы возникновения гипераммонемии, подагры, оротацидурии.

ЗАДАЧИ ОБУЧЕНИЯ:

Сформировать представление о метаболизме аммиака и нуклеотидов.

ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ ТЕМЫ:

1. Биосинтез пуриновых нуклеотидов: происхождение атомов пуринового кольца, начальные стадии биосинтеза, регуляция биосинтеза.

2. Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Концентрация мочевой кислоты в крови. Гиперурикемия и подгра.

3. Биосинтез и катаболизм пиримидиновых нуклеотидов. Регуляция этих процессов.

4. Биосинтез дезоксирибонуклеотидов. Регуляция процесса.

5. Понятие об остаточном азоте. Нормальный уровень остаточного азота в крови. Диагностическое значение определения остаточного азота и мочевины в крови.

Методы обучения и преподавания: практическое занятие – работа в малых группах

1 группа- биосинтез и катаболизм пуриновых оснований

2 группа – биосинтез и катаболизм пиримидиновых оснований

3 группа – биосинтез и регуляция дезоксирибонуклеотидов.

В ходе работы обратить внимание на следующее:

1. В синтезе и пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов используется 5-фосфорибозил 1 пирофосфат.

2. Нуклеотиды синтезируются из низкомолекулярных предшественников, для пуринов имеется пути спасения - использование имеющихся аденина, гипоксантина и гуанина при помощи двух специфических ферментов.

3. В образовании дезоксирибонуклеотидов участвует белок тиоредоксин.

4. Конечный продукт распада пуринов у человека - мочевая кислота, при её повышении в крови развивается подагра.

5. Многие противоопухолевые препараты ингибируют синтез нуклеотидов.

О С Н О В Н А Я Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Конспект лекций.

2. Николаев А.Я., Биохимия, стр. 314-323, 339-351.

3. Т.Т.Березов, Б.Ф.Коровкин «Биологическая химия», 1990, стр. 350 - 354, 448-449, 369-376, 390-394.

4. Шарманов Т.Ш., Плешкова С.М. «Метаболические основы питания с курсом общей биохимии», Алматы, 1998, стр.

Д О П О Л Н И Т Е Л Ь Н А Я Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Строев Е.А. «Биологическая химия», стр. 278, 281 - 285.

2. Страйер Л. «Биохимия», т. 2, стр. 160-166.

3. У. Мак-Мюррей «Обмен веществ у человека», стр. 280-289.

4. Р.Марри Биохимия человека, 1993.

5. Бохински Современные воззрения в биохимии, 1987 с, 440, 458-470

КОНТРОЛЬ:

1. Напишите схему реакций синтеза дезоксирибонуклеотидов.

2. Напишите схему реакций синтеза тимидилтрифосфатов. Укажите ферменты, коферменты.

3. Основные пути синтеза и распада пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов и дезоксирибонуклеотидов.

4. Нарушения и патологические состояния, возникающие при нарушении этих процессов.

5. Компоненты остаточного азота крови, диагностическое значение определения остаточного азота.

КАЗАХСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

КАФЕДРА биохимии с курсом общей химии

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОГО ЗАНЯТИЯ

Тема: Определение метаболитов и ферментов азотистого обмена в крови

Количество часов 1

Курс 2

Специальность – общая медицина

Составитель (и):

д.х.н., проф. Сейтембетова А.Ж.

доц. Блудова С.А.

к.х.н., преп. Габбасова А.М.

Астана, 2008 г.

Обсуждено и утверждено на заседании кафедры

«____»___________200__г., протокол №_______

Зав.кафедрой _______________ Сейтембетова А.Ж.

(подпись)

Тема: Определение метаболитов и ферментов азотистого обмена в крови

Цель: научить определять мочевину и аминотрансферазы в сыворотке крови и интерпретировать полученные результаты.

Задачи обучения:

1.знать принципы методов определения мочевины и аминотрансферазы в сыворотке крови;

2.уметь составлять алгоритм проведения анализа;

3.уметь определять мочевину и аминотрансферазу в сыворотке крови;

4.знать диагностическую ценность данного анализа;

5.уметь интерпретировать полученные результаты.

Основные вопросы темы:

1.Роль мочевины в азотистом обмене.

2.Норма уровня мочевины в сыворотке крови.

3.Причины понижения уровня мочевины в сыворотке крови.

4.Роль аминотрансфераз в азотистом обмене.

5.Принцип метода определения мочевины в сыворотке крови.

6.Принцип метода определения аминотрансфераз в сыворотке крови.

7.Диагностическое значение определения мочевины в сыворотке крови.

8.Диагностическое значение определения аминотрансфераз в сыворотке крови.

Методы обучения – лабораторная работа.

Принцип метода определения мочевины в сыворотке крови – мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильнокислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного железа красный комплекс. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации мочевины в сыворотке крови и измеряется фотометрически.

Для работы используются наборы «Биотест» для определения мочевины фирмы PLIVA-Lachema Diagnostika.

Для анализа используется негемолизированная сыворотка крови или плазма (гепарин, ЭДТА).

Проведение анализа:

Отмерить (мл)	проба	стандарт	контроль
сыворотка	0,01	-	-
реактив 1	-	0,01	-
дист. вода	-	-	0,01
раствор 2	2,00	2,00	2,00

Отверстие пробирок закрывают алюминиевой фольгой и пробирки помещают точно на 10 мин в кипящую водяную баню. Потом содержимое пробирок быстро охлаждают под проточной водой и измеряют оптическую плотность пробы (А₁) и стандарта (А₂) против контрольного раствора. Измерение проводить до 15 мин после охлаждения.

Расчет

Мочевина (моль/л) = 16,65х А₁/А₂

Нормальные величины мочевины в сыворотке крови:

Мочевина в сыворотке крови (моль/л) 2,5 – 8,3

Мочевина в моче за сутки (моль/24 ч) 333 – 583

Диагностическое значение определения мочевины в сыворотке крови.

Мочевина, конечный продукт обмена аминокислот, образуется в печени. Увеличение в несколько раз относительно верхнего предела нормы концентрации мочевины, сопровождающееся, как правило, выраженным клиническим синдромом интоксикации, называют уремией. Уремия, как и гиперазотемия, бывает абсолютной и относительной, продукционной и ретенционной. Определение мочевины имеет наибольшее значение для диагностики заболеваний почек.

При почечной патологии содержание мочевины нарастает гораздо быстрее, чем всех остальных компонентов остаточного азота, так как мочевина в наибольшей степени задерживается крови при ухудшении функции почек. Если в норме уровень азота мочевины составляет около 50%

остаточного азота сыворотки, то при почечной недостаточности он может увеличиваться до 90%.

Внепочечная ретенционная уремия наблюдается при нефролитиазе, рефлекторной анурии, опухолях предстательной железы, опухолях и камнях в мочевыводящих путях, сердечной декомпенсации.

Продукционная уремия выявляется при патологиях, сопровождающихся усиленным распадом белка: перитоните, аппендиците (особенно флегмонозном и гангренозном), закупорке кишок, ожогах, холере, лейкемии, инфаркте миокарда, тяжелых инфекционных заболеваниях, болезни Аддисона и т.д.

При обезвоживании организма (дизентерия) наблюдается относительная уремия.

К повышению уровня мочевины в сыворотке крови приводит прием анаболических стероидов, бутадиона, допегита, альдомета, препаратов железа, алкалоидов раувольфии, а также нефротоксичные лекарственные препараты.

Повышенное содержание мочевины в моче отмечается у больных со злокачественной анемией, лихорадкой, при диете с высоким содержанием белка, после приема салицилатов, хинина, при отравлении фосфором

Понижение уровня мочевины в моче выявляется у больных с уремией, нефритом, ацидозом, паренхиматозной желтухой, острой дистрофией печени, прогрессирующим циррозом.

Принцип метода определения аминотранферазы в сыворотке крови –аспартатаминотрансфераза катализирует реакцию между аспартатом и α-кетоглутаратом, в результате которой образуются глутамат и оксалоацетат. Определение основано на измерении оптической плотности гидразонов α-кетоглутарата и пирувата в щелочной среде. Гидразон пирувата, возникающий при самопроизвольном декарбоксилировании оксалоацетата, обладает более высокой оптической плотностью.

Для работы используются наборы «Биотест» для определения аминотрансфераз фирмы PLIVA-Lachema Diagnostika.

Для анализа используется негемолизированная сыворотка крови или плазма (гепарин, ЭДТА).

Проведение анализа:

Отмерить (мл)	контроль	проба
Реактив 4	0,25 мл	0,25 мл
Физ. раствор	0,05 мл	-

Инкубируют 3 мин при 37^оС

Сыворотка крови

-

0,05 мл

Инкубируют точно 60 мин при 37^оС

Реактив 2

0,25 мл

0,25 мл

Перемешивают и оставляют стоять 20 мин при комнатной температуре.

Раствор NаОН

2,5 мл

2,5 мл

Перемешивают и спустя 10 мин измеряют оптическую плотность пробы против контроля

Расчет: по оптической плотности пробы в калибровочном графике находят концентрацию фермента.

Нормальные величины аминотрасферазы в сыворотке крови (мккат/л):

АсАТ 0,06-0,14

Предельные величины 0,42

Диагностическое значение определения аминотрансфераз в сыворотке крови.

Активность аминотрансфераз исследуют для дифференциальной диагностики патологии печени и миокарда.

При инфаркте миокарда активность АсАТ в 95% случаев повышена, возрастание ее уровня происходит через 4-6 ч с момента приступа, через 24-36 ч увеличивается в 4-5 раз по сравнению с верхней границей нормы и лишь на 3-и – 7-е сутки снижается до нормы.

При патологии печени повышается АлАТ. Максимальное повышение АсАт и АлАТ происходит при остром вирусном гепатите – более чем 100 раз, снижение происходит медленно в течение нескольких недель и даже месяцев.

Результаты занести в тетради, сравнить с нормальными показателями, сделать выводы.

Литература:

1.Тапбергенов С.О. Медицинская биохимия.- Астана, 2001,с.214.

2.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия.- М.,2005,с.438.

3.Биохимия, под ред. Чл.-корр. РАН, проф. Е.С. Северина.- М.,2005,с.16, 682.

4.Николаев А.Я. Биологическая химия.- М.,2004, с.59, 504.

5.Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике.-Минск, 2000, т.1,с. 286, 389.

Контрольные вопросы:

Принцип метода определения мочевины и аминотрансфераз в сыворотке крови?

В каких случаях происходит понижение уровня мочевины в сыворотке крови?

Где образуется мочевина?

Какую реакцию катализирует АсАТ?

В чем причины повышения аминотрансфераз в сыворотке крови?

Диагностическое значение определения мочевины и аминотрансфераз в крови?

КАЗАХСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

КАФЕДРА биохимии с курсом общей химии

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СЕМИНАРСКОГО ЗАНЯТИЯ

Тема: «ОБМЕН АМИНОКИСЛОТ И НУКЛЕОТИДОВ»

Количество часов 2

Курс 2

Специальность –общая медицина

Составитель (и):

д.х.н., проф. Сейтембетова А.Ж.

доц. Блудова С.А.

к.х.н., преп. Габбасова А.М.

Астана, 2008 г.

Обсуждено и утверждено на заседании кафедры

«____»___________200__г., протокол №_______

Зав.кафедрой _______________ Сейтембетова А.Ж.

(подпись)

ТЕМА: «ОБМЕН АМИНОКИСЛОТ И НУКЛЕОТИДОВ»

ЦЕЛИ ЗАНЯТИЯ:

1.Знать процессы поступления, синтеза и катаболизма аминокислот и нуклеотидов;

2.Знать пути обезвреживания аммиака;

3. Знать нарушения обменов аминокислот и нуклеотидов.

ЗАДАЧИ ОБУЧЕНИЯ:

1.Систематизировать и обобщать знания по важнейшим вопросам обмена белков и нуклеотидов

2. Применять эти знания для анализа патологических состояний и при решении ситуационных задач.

ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ ТЕМЫ:

1. Особенности обмена фенилаланина и тирозина. Наследственные нарушения процессов обмена этих аминокислот.

2. Обмена метионина. Участие метионина в биосинтезе различных веществ.

3. Роль тетрагидрофолиевой кислоты (ТГФК) и её производных в биосинтезе одноуглеродных групп. Антиметаболиты.

4. Обмена глицина, серина, цистеина.

5. Патология азотистого обмена: квашиоркор, аминоацидурии, гиперурикемии и т.д.

6. Диагностическое значение определения фенилаланина и гомогентизиновой кислоты.

7.Биосинтез пуриновых нуклеотидов: происхождение атомов пуринового кольца, начальные стадии биосинтеза, регуляция биосинтеза.

8.Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Концентрация мочевой кислоты в крови. Гиперурикемия и подгра.

9.Биосинтез и катаболизм пиримидиновых нуклеотидов. Регуляция этих процессов.

11.Биосинтез дезоксирибонуклеотидов. Регуляция процесса.

12.Понятие об остаточном азоте. Нормальный уровень остаточного азота в крови. Диагностическое значение определения остаточного азота и мочевины в крови.

Методы обучения и преподавания: коллоквиум– устный и письменный контроль

О С Н О В Н А Я Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Конспект лекций.

2. А.Я.Николаев «Биохимия», 1989 г., стр. 303-351.

3. Т.Т.Березов «Биохимия», 1990 г., стр. 318 - 377, 190 - 395, 448 - 449.

4. Т.Ш.Шарманов, С.М.Плешкова «Метаболические основы питания с курсом общей биохимии», Алматы, 1998 г.

Д О П О Л Н И Т Е Л Ь Н А Я Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. У.Мак-Мюррей «Обмен веществ у человека», стр. 263 - 340.

2. Ж. Крю «Биохимия», стр. 427-449.

3. А. Ленинджер «Основы биохимии», стр. 571 - 598, 653-674.

4. Л.Страйер «Биохимия», стр. 160 - 178, 230 - 248, 255 - 270, 273 - 277.

5. Е.А.Строев «Биохимия», 1986 г., стр. 274-291, 297-300.

Методические указания для студентов к лабораторному занятию № 16

КОНТРОЛЬ:

Вопросы коллоквиума:

1.Источники и пути расходования аминокислот. Полноценные и неполноценные белки. Азотистый баланс.

2.Переваривание белков. Протеолитические ферменты, их активация.

3.Анализ желудочного сока. Нарушения переваривания белков при заболеваниях органов желудочного кишечного тракта. Использование результатов анализа для диагностики.

4.Всасывание аминокислот. Гниение белков в кишечнике.

5.Распад тканевых белков. Катепсины.

6.Общие (восстановительное аминирование и трансаминирование) и специфические пути биосинтеза аминокислот. Роль глутаминовой кислоты в этих процессах.

7.Окислительное дезаминирование аминокислот. Глутаматдегидрогеназа. Непрямое дезаминирование аминокислот.

8.Пути катаболизма безазотистого остатка аминокислот. Гликогенные и кетогенные аминокислоты.

9.Обмен аммиака: источники и пути обезвреживания (аминирование, амидирование, аммониогенез, синтез мочевины). Транспорт аммиака.

10.Остаточный азот крови. Принцип определения, нормальные показатели, диагностическое значение.

11.Биосинтез мочевины как механизм обезвреживания аммиака. Нарушение обмена аммиака и мочевины.

12.Особенности обмена глицина, серина, цистеина. Участие ТГФК в переносе одноуглеродных остатков. Недостаточность фолиевой кислоты. Механизм бактериостатического действия сульфаниламидных препаратов.

13.Метионин, его роль в реакциях трансметилирования. Участие ТГФК в реакциях переноса одноуглеродного остатка.

14.Особенности обмена фенилаланинна и тирозина. Наследственные нарушения процессов обмена аминокислот.

15.Обмен дикарбоновых аминокислот. Амидирование как один из путей обезвреживания аммиака.

16.Декарбоксилирование аминокислот. Биогенные амины и их роль в обмене веществ и регуляция физиологических функций.

17.Инактивация биогенных аминов. Моноаминооксидазы. Участие аминокислот и их производных в синаптической передаче нервных импульсов.

18.Биосинтез пуриновых нуклеотидов: происхождение атомов пуринового кольца, начальные стадии биосинтеза (от рибозо-5-фосфата до 5-фосфорибозиламина). Регуляция биосинтеза.

19.Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Концентрация мочевой кислоты в крови. Гиперурикемия и подагра. Противоопухолевые средства.

20.Биосинтез и катаболизм пиримидиновых нуклеотидов. Регуляция этих процессов. Антиметаболиты, применение в лечении.

21.Биосинтез дезоксирибонуклеотидов. Регуляция этого процесса.

Письменный контроль:

Билет 1

1 Источники и пути расходования аминокислот. Полноценные и неполноценные белки. Азотистый баланс.

2 Переваривание белков. Протеолитические ферменты, их активация.

3 Анализ желудочного сока. Нарушения переваривания белков при заболеваниях органов желудочного кишечного тракта. Использование результатов анализа для диагностики.

Билет 2

1. Всасывание аминокислот. Гниение белков в кишечнике.

2. Распад тканевых белков. Катепсины.

3. Общие (восстановительное аминирование и трансаминирование) и специфические пути биосинтеза аминокислот. Роль глутаминовой кислоты в этих процессах.

Билет 3

1. Окислительное дезаминирование аминокислот. Глутаматдегидрогеназа. Непрямое дезаминирование аминокислот.

2. Пути катаболизма безазотистого остатка аминокислот. Гликогенные и кетогенные аминокислоты.

3. Обмен аммиака: источники и пути обезвреживания (аминирование, амидирование, аммониогенез, синтез мочевины). Транспорт аммиака.

Билет 4

1. Остаточный азот крови. Принцип определения, нормальные показатели, диагностическое значение.

2. Биосинтез мочевины как механизм обезвреживания аммиака. Нарушение обмена аммиака и мочевины.

3. Особенности обмена глицина, серина, цистеина. Участие ТГФК в переносе одноуглеродных остатков. Недостаточность фолиевой кислоты. Механизм бактериостатического действия сульфаниламидных препаратов.

Билет 5

1. Метионин, его роль в реакциях трансметилирования. Участие ТГФК в реакциях переноса одноуглеродного остатка.

2. Особенности обмена фенилаланина и тирозина. Наследственные нарушения обмена аминокислот.

3. Обмен дикарбоновых аминокислот. Амидирование как один из путей обезвреживания аммиака.

Билет 6

1. Декарбоксилирование аминокислот. Биогенные амины и их роль в обмене веществ и регуляции физиологических функций.

2. Инактивация биогенных аминов. Моноаминооксидазы. Участие аминокислот и их производных в синаптической передаче нервных импульсов.

3. Биосинтез пуриновых нуклеотидов: происхождение атомов пуринового кольца, начальные стадии биосинтеза (от рибозо-5-фосфата до 5-фосфорибозиламина). Регуляция биосинтеза.

Билет 7

1. Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Концентрация мочевой кислоты в крови. Гиперурикемия и подагра. Противоопухолевые средства.

2. -2-

3. Биосинтез и катаболизм пиримидиновых нуклеотидов. Регуляция этих процессов. Антиметаболиты, применение в противоопухолевой терапии.

4. Биосинтез дезоксирибонуклеотидов. Регуляция этого процесса.

Билет 8

1 Источники и пути расходования аминокислот. Полноценные и неполноценные белки. Азотистый баланс.

2 Переваривание белков. Протеолитические ферменты, их активация.

3 Анализ желудочного сока. Нарушения переваривания белков при заболеваниях органов желудочного кишечного тракта. Использование результатов анализа для диагностики.

Билет 9

1.Всасывание аминокислот. Гниение белков в кишечнике.

2. Распад тканевых белков. Катепсины.

3. Общие (восстановительное аминирование и трансаминирование) и специфические пути биосинтеза аминокислот. Роль глутаминовой кислоты в этих процессах.

Билет 10

1. Окислительное дезаминирование аминокислот. Глутаматдегидрогеназа. Непрямое дезаминирование аминокислот.

2. Пути катаболизма безазотистого остатка аминокислот. Гликогенные и кетогенные аминокислоты.

3. Обмен аммиака: источники и пути обезвреживания (аминирование, амидирование, аммониогенез, синтез мочевины). Транспорт аммиака.

Билет 11

1. Остаточный азот крови. Принцип определения, нормальные показатели, диагностическое значение.

2. Биосинтез мочевины как механизм обезвреживания аммиака. Нарушение обмена аммиака и мочевины.

3. Особенности обмена глицина, серина, цистеина. Участие ТГФК в переносе одноуглеродных остатков. Недостаточность фолиевой кислоты. Механизм бактериостатического действия сульфаниламидных препаратов.

Билет 12

1. Метионин, его роль в реакциях трансметилирования. Участие ТГФК в реакциях переноса одноуглеродного остатка.

2. Особенности обмена фенилаланина и тирозина. Наследственные нарушения обмена аминокислот.

3. Обмен дикарбоновых аминокислот. Амидирование как один из путей обезвреживания аммиака.

Билет 13

1. Декарбоксилирование аминокислот. Биогенные амины и их роль в обмене веществ и регуляции физиологических функций.

2. Инактивация биогенных аминов. Моноаминооксидазы. Участие аминокислот и их производных в синаптической передаче нервных импульсов.

3. Биосинтез пуриновых нуклеотидов: происхождение атомов пуринового кольца, начальные стадии биосинтеза (от рибозо-5-фосфата до 5-фосфорибозиламина). Регуляция биосинтеза.

Билет 14

1. Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Концентрация мочевой кислоты в крови. Гиперурикемия и подагра. Противоопухолевые средства.

2. Биосинтез и катаболизм пиримидиновых нуклеотидов. Регуляция этих процессов. Антиметаболиты, применение в противоопухолевой терапии.

3. Биосинтез дезоксирибонуклеотидов. Регуляция этого процесса.

КАЗАХСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

КАФЕДРА биохимии с курсом общей химии

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРАКТИЧЕСКОГО ЗАНЯТИЯ

Тема: БИОХИМИЯ ГОРМОНОВ.

Количество часов 3

Курс 2

Специальность –общая медицина

Составитель (и):

д.х.н., проф. Сейтембетова А.Ж.

доц. Блудова С.А.

к.х.н., преп. Габбасова А.М.

Астана, 2008 г.

Обсуждено и утверждено на заседании кафедры

«____»___________200__г., протокол №_______

Зав.кафедрой _______________ Сейтембетова А.Ж.

(подпись)

Дата добавления: 2015-05-26