Реактивы для определения качества углеводов

ПРИЛОЖЕНИЕ

1. Растворы гидрата окиси натрия.

а). Концентрированный раствор NaOH. Для приготовления различ­ных растворов NaOH рекомендуется вначале готовить концентрирован­ный раствор (40% и выше), так как в таком растворе многие приме­си, содержащиеся в реактиве, не растворяются и при стоянии оседают на дно. Для этого около 300 г NaOH (ХЧ) растворяют в 500 мл свежепрокипяченной и охлажденной до 200°С дистиллированной воды в фар­форовой посуде. После полного растворения щелочи и остывания раст­вора до 20 – 30°С его переливают в стеклянную бутыль, внутренняя по­верхность которой покрыта слоем парафина во избежание разъедания стекла и выщелачивания из него различных компонентов. Бутыль закры­вают резиновой пробкой с трубкой, наполненной хлористым кальцием. Отстаивание продолжается не менее 2 дней. Отстоявшийся прозрачный концентрированный раствор NaOH осторожно декантируют в другую склянку, внутренние стенки которой покрыты парафином, ареометром определяют плотность и по табл. 31 находят процентное содержание щелочи, которую используют для дальнейших разведений.

б). 1 н раствор NaOH. 1 г-экв NaOH равен 40,0 г, поэтому в 1 л раст­вора должно содержаться 40 г NaOH. Зная содержание NaOH в 100 мл концентрированного раствора (1 а), можно из него приготовить 1н рас­твор NaOH.

в). 0,1 н раствор NaOH. 1л раствора должен содержать 4 г NaOH. Приготавливают путем разведения концентрированного раствора (1 а) свежекипяченой и охлажденной до 20°С дистиллированной водой, после чего по 0,1 н раствору щавелевой кислоты (раствор 6 а) уста­навливают его титр и рассчитывают поправочный коэффициент К = а / b, где а – количество взятой на установку титра 0,1 н раствора NaOH щавелевой кислоты, мл; b – количество израсходованного на титрование приготовленного раствора NaOH, мл. Для приведения ре­зультата титрования приготовленным раствором NaOH к децинормальному величину расхода его (мл) умножают на поправочный коэффи­циент К. Можно приготовить 0,1 н раствор NaOH из фиксанала, если раствор в ампуле прозрачен и не содержит осадка.

г). 2,5 н раствор NaOH. В 1 л раствора должно содержаться 100 г NaOH. Готовят соответствующим разведением из концентрированного раствора NaOH. Титр раствора устанавливают титрованием в присутствии индикатора метилового красного 1 н растворами соля­ной или серной кислот. На 10 мл 2,5 н NaOH должно пойти 25 мл 1 н раствора кислоты. Если кислоты идет больше или меньше, то кон­центрацию NaOH соответственно изменяют.

д). Процентные растворы. Готовят из концентрированного раствора (1 а).

2. 30%-ный нейтральный раствор уксуснокислого свинца. 300 г уксуснокислого свинца растирают с 100 г PbO (свинцовый глет) и 50 мл воды в фарфоровой чашке. Накрывают смесь стеклом и выдерживают на водяной бане, пока смесь не сделается однородной, розового оттен­ка. Затем прибавляют, все время перемешивая, 950 мл горячей воды, смесь переносят в колбу, плотно закрывают и оставляют на 12 часов в теплом, месте для отстаивания. После этого раствор фильтруют в сухую склянку и закрывают плотно притертой пробкой во избежание образо­вания PbСО₃.

3. Растворы сернокислой меди.

а). Фелинг 1. Сначала производят перекристаллизацию CuSO₄. Для этого 70 г сернокислой меди растворяют при нагревании в 100 мл дис­тиллированной воды. К раствору добавляют 1 – 2 капли концентрирован­ной азотной кислоты на каждые 100 мл раствора для окисления возмож­ных примесей железа, доводят до кипения и фильтруют горячий раствор через складчатый фильтр. Фильтрат охлаждают, образовавшиеся в охлаж­денном фильтрате мелкие кристаллы сернокислой меди отсасывают и высушивают на воздухе между листами фильтровальной бумаги. 69,28 г свежеперекристаллизованного сульфата меди растворяют в дистиллиро­ванной воде и доводят объем в мерной колбе до 1000 мл, после чего фильтруют.

б). Фелинг I (по Бертрану). 40 г сернокислой меди растворяют в дистиллированной воде и доводят объем в мерной колбе до 1000 мл.

4. Растворы калия-натрия виннокислого (сегнетовая соль).

а). Фелинг II (по Бертрану). 200 г сегнетовой соли растворяют в 500 – 600 мл дистиллированной воды, фильтруют в мерную колбу вмести­мостью 1 л, добавляют 150 г NaOH и доводят раствор до метки дистил­лированной водой.

б). Фелинг II (для прямого титрования). 346 г виннокислого калия-натрия растворяют при слабом нагревании в 400 – 500 мл дистиллиро­ванной воды, прибавляют 100 г NaOH, растворенной в 200 – 300 мл дис­тиллированной воды, перемешивают и доводят объем в мерной колбе дистиллированной водой до 1000 мл.

Титр фелинговой жидкости устанавливают по точной навеске хими­чески чистой глюкозы. Навеску 0,2011 г глюкозы переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют сначала в 50 – 60 мл дистил­лированной воды, а затем доводят объем до метки. В коническую колбу на 100 мл пипеткой отбирают 10 мл раствора глюкозы, добавляют 5 мл Фелинга I (раствор 3 а) и 5 мл Фелинга II (раствор 4 б), смесь доводят до кипения в течение 2 мин. При появлении красной окраски раствора добавляют 5 капель 1%-ного раствора метиленового голубого (раст­вор 21) и титруют тем же раствором глюкозы до появления красного осадка закиси меди. Поправочный коэффициент на титр Фелинговой жидкости К = 25,5/ V, где V – объем испытуемого раствора, пошедший на титрование, мл.

5. Растворы перманганата калия.

а). 0,1 н раствор КМnО₄. В 1 л раствора должно содержаться 3,1607 г КМnО₄. Кристаллический перманганат имеет ряд примесей. Кроме того, в первые дни после приготовления раствора происходит окисление слу­чайных органических веществ, содержащихся в дистиллированной воде, вследствие чего концентрация раствора перманганата калия постепенно изменяется. Поэтому навеску берут 3,2 г, переносят в мерную колбу вмес­тимостью 1 л, доливают до метки свежепрокипяченной и охлажденной до 20°С дистиллированной водой, тщательно перемешивают до полно­го растворения перманганата и переливают в сухую склянку из темного стекла с притертой пробкой. Затем оставляют в темноте на 10 – 14 дней для окисления всех веществ и осаждения двуокиси марганца. По прошествии указанного времени раствор осторожно декантируют с осадка или фильтруют через стеклянный фильтр. Через бумажный фильтр раствор перманганата фильтровать нельзя. Титр выстоявшегося и профильтрованного раствора, защищенного от пыли, света и испарения, практи­чески не изменяется длительное время. Титр раствора устанавливают по 0,1 н раствору щавелевой кислоты (раствор 6 а). Для этого пипет­кой отмеряют в коническую колбу 25 мл 0,1 н раствора щавелевой кислоты, добавляют 15 мл 2 н раствора H₂SO₄ и нагревают до 80 – 90°C (но не до кипения), затем медленно титруют раствором перманганата при энергичном перемешивании до появления едва заметного устойчи­вого бледно-розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин. За окончательный результат принимают среднее арифметическое 3 па­раллельных определений. Поправочный коэффициент рассчитывают, как указано выше. Раствор КМnО₄ необходимо хранить в стеклянной склянке из темного стекла с притертой пробкой. При титровании необходимо пользоваться бюретками со стеклянным краном.

б). Раствор для, определения cахаров по Макс-Мюллеру. 5 г КМnО₄ растворяют в свежепрокипяченной дистиллированной воде в мерной кол­бе вместимостью 1000 мл и переливают в темную склянку. Через 8 – 14 дней раствор фильтруют через стеклянную вату. 1 мл фильтрата должен соответствовать 10 мг меди.

6. Растворы щавелевой кислоты.

а). 0,1 н раствор С₂Н₂О₄. 1 г-экв щавелевой кислоты 126,066:2 = 63,033, поэтому 0,1 н раствор С₂Н₂О₄ должен содержать 6,3033 г щавелевой кислоты в 1 л. С точностью до 0,0001 г отвешивают навеску перекристаллизованной щавелевой кислоты и растворяют ее в 1 л свежепрокипяченной и охлажденной до 20°С дистиллированной воды. Можно приготовить раствор из фиксанала. Раствор нестойкий, хранить 10 дней.

б). Для определения поправочного коэффициента раствора КМnО₄ по методу Макс-Мюллера. Навеску 0,2483 г щавелевой кислоты количественно переносят в коническую колбу, растворяют в 100 мл дистил­лированной воды и добавляют 2 мл концентрированной серной кисло­ты. Раствор нагревают до 80°С и титруют раствором марганцевокислого калия до появления неисчезающей розовой окраски. Поправоч­ный коэффициент определяют по формуле К = 25/ V, где V – объем раствора марганцевокислого калия, пошедшего на титрование взятом навовкф щавелевой кислоты, мл; 25 – объем раствора марганцевокис­лого калия, соответствующий 0,2483 г щавелевой кислоты, мл.

7. Растворы бихромата калия.

а). Хромовая смесь. 9,2 г бихромата калия растворяют в 100 мл концентрированной серной кислоты.

б). 0,2 н раствор К₂Сr₂O₇. Предварительно бихромат калия перекристаллизовывают. Для этого 100 г К₂Сr₂O₇ растворяют в 150 г ки­пящей воды и, энергично размешивая, выливают тонкой струей в фарфоровую чашку, которую ставят в ледяную воду для получения мелких кристаллов. Выпавшие кристаллы отфильтровывают на фильтрующей воронке ВФ со стеклянным фильтром под слабым вакуумом, затем сушат при температуре 100 – 105°С в течение 2 – 3 ч, растирают в по­рошок и окончательно высушивают при температуре 200° С в течение 10 – 12 ч. Чистота полученного бихромата 99,97 – 100,00% К₂Сr₂O₇. 1 моль биохромата калия равен 294,18: 6 = 49,03 г. Навеску 9,806 г пе­рекристаллизованного бихромата калия отвешивают на аналитических весах, переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят до метки дистиллированной водой. Растворы биохромата калия чрезвычайно устойчивы.

в). 0,1 н раствор К₂Сr₂O₇ готовят так же, как предыдущий, только навеску перекристаллизованного К₂Сr₂O₇ на 1 л раствора берут 4,903 г.

8. Раствор железосинеродистого калия. Для приготовления 1%-ного раствора 1 г К₃[Fe(CN)₆] растворяют в 100 мл дистиллированной воды. В водном растворе красная кровяная соль постепенно разлагается с образованием желтой кровяной соли. Поправочный коэффициент устанавливают йодометрическим методом. Для этого в склянку с притертой пробкой отбирают пипеткой 50 мл 1%-ного K₃[Fe(CN)₆], прибавляют 20 мл 10%-ного раствора сернокислого цинка, не содержащего железа (раствор 62 а), и 20 мл 20%-ного раствора йодистого калия, несодержащего свободного йода (раствор 29 б). Склянку закрывают пробкой, тщательно взбалтывают и тотчас же титруют вьщелившийся йод 0,1 н раствором гипосульфита натрия (раствор 14) в присутствии крахмала в качестве индикатора (раствор 16). Поправку вычисляют с точностью до 0,0001: К = V ×0,03291 / 0,5, где V – объем точно 0,1 н раствора гипосульфита, пошедшего на титрование выделившегося йода, мл; 0,03291 – количество железосинеродистого калия в 1 мл раствора, г.

9. Раствор антрона (10-дигидро-9-катоантрацена). Для приготовления 0,2%-ного раствора используют концентрированную серную кислоту Саваля с относительной плотностью 1,83. Навеску 0,9175 г химически чистого антрона помещают в мерную колбу на 250 мл, добавляют 100 – 150 мл серной кислоты и перемешивают до полного растворения. Объем жидкости в колбе доводят серной кислотой до метки. Приготовленный раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 4 ч в темном месте, после чего он готов к употреблению. Раствор антрона следует хранить при температуре 4 – 6°С в темном месте не более 12 – 15 суток.

10. 5%-ный водный раствор фенола. Фенол – бесцветная кристаллическая масса, под действием света и воздуха розовеет. Фенол, приобретающий розовую окраску, очищают перегонкой. Для этого его помещают в перегонную колбу, закрытую корковой пробкой, в которую ставлена под острым углом стеклянная трубка диаметром 1 – 2 см и длиной 25 см. Трубка вставляется в колбу-приемник, помещенную в ристаллизатор с холодной водой. При кипении фенола пары собираются в колбу-приемник и быстро кристаллизуются. Необходимо помнить, что фенол является ядом, легко всасывается в кожу. Поэтому все операции с фенолом и его растворами следует проводить в вытяжном шкафу и в резиновых, перчатках. 50г свежеперегнанного фенола растворяют в 1 л дистиллированной воды.

11. 0,1%-ный спиртовый раствор резорцина. 100 мг резорцина C₆H₄(OH)₂ переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 96%-ном этаноле, доводят им до метки и тщательно перемешивают.

12. 2 н раствор хлористого кальция. 1 г-экв безводного СаСl₂ равен 55,5 г, а содержащего 6 молекул воды – 109,54 г. Поэтому в 1 л 2 н раствора должно содержаться 219,08 г хлористого кальция или 110,99 г безводного прокаленного хлористого кальция.

13. Водная солодовая вытяжка. 100 г измельченного зеленого солода настаивают в 1 л воды в течение 6 ч при частом взбалтывании, фильтруют и пользуются свежеприготовленной вытяжкой.

14. 0,1 н раствор гипосульфита натрия Na₂S₂O₃∙5Н₂О (тиосульфат). 1 г-экв гипосульфита натрия равен 248,17 г. В связи с тем, что в первые 10 дней гипосульфит натрия реагирует с угольной кислотой, растворенной в воде, и образует бисульфит натрия, 1 моль которого равен 0,5 моля тиосульфата натрия, поэтому навеску кристаллического тиосульфата натрия берут ~25 г, переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и долива­ют до метки свежепрокипяченной и охлажденной до 20°С дистиллиро­ванной водой. Титр раствора устанавливают не раньше, чем через 10 дней после его приготовления. Для повышения устойчивости раствора гипо­сульфита натрия рекомендуется добавлять 0,1 г карбоната натрия на 1 л раствора. Полученный раствор сохраняют в темной склянке, закрытой пробкой с хлоркальциевой трубкой, наполненной натронной известью, для защиты от СО₂ воздуха. Надо иметь в виду, что титр раствора при хранении изменяется вследствие окисления тиосульфатом кислорода воздуха, поэтому перед употреблением его следует проверять. Провер­ку нормальности раствора проводят по 0,1 н раствору бихромата калия (раствор 7 в). Для этого 25 мл 0,1 н К₂Сr₂O₇ отмеривают пипеткой в колбу для титрования, в которой находятся 1 – 2 мл 10%-ного раст­вора H₂SO₄ и 5 – 7 мл 20%-ного свежеприготовленного раствора йодида калия. Смесь хорошо перемешивают и оставляют стоять 5 – 10 мин в темноте для завершения реакции, затем разбавляют водой до 200 мл и титруют приготовленным раствором гипосульфита натрия до светло-желтого окрашивания; добавляют 2 – 3 мл 1%-ного раствора раство­римого крахмала (раствор 16) и продолжают титровать гипосульфитом до перехода синей окраски в светло-зеленую.

15. Раствор йода.

а). 0,1 н раствор 12. Навеску йода 12,7 г растворяют в 300 мл вод­ного раствора KI, содержащего 40 г йодида калия, и разбавляют дистил­лированной водой до 1 л. После 2 – 3 дней выстаивания устанавливают нормальность раствора по 0,1 н раствору тиосульфата натрия (раствор 14). Для этого 25 мл приготовленного раствора йода отбирают пипет­кой в колбу для титрования, добавляют 20 – 30 мл воды и титруют 0,1 н раствором Na₂S₂O₃ до желтой окраски. Затем добавляют 2 – 3 мл 1%-ного раствора крахмала и титруют синий раствор до полного обесцвечивания. Расчет поправочного коэффициента производят так же, как для 0,1 н NaOH.

б). 2%-ный раствор 12: 2 г йода и 4 г йодистого калия растворяют в 100 мл дистиллированной воды.

16. 1%-ный раствор крахмала. В фарфоровой ступке растирают 10 г растворимого крахмала со 100 мл горячей воды. Растертую каши­цу вливают в 900 мл кипящей воды, прибавляют 2 – 3 капли концен­трированной НСl и кипятят 3 – 5 мин. После охлалщения и отстаивания в течение суток раствор фильтруют. Хранят раствор в прохладном месте 10 – 12 дней.

17. 30 %-ный раствор соляной кислоты. Имеет плотность 1,149. Для приготовления 1 л раствора требуется 300 г НСl. Концентрированная содержит 37,3% НСl, следовательно, ее потребуется 37,3/100= 300/ Х, Х = 100×300/37,3 = 804,3 г или 804,3: 1,185 = 678,7 мл НСl плот­ностью 1,185.

18. 1 н раствор уксусной кислоты. СН₃СООН. 1 г-экв уксусной кис­лоты равен 60,05 г. Имеющаяся уксусная (ледяная) кислота содержит 99,8% СН₃СООН (плотность 1,0503), следовательно, ее потребуется 100/99,8 = Х /60,05, Х = 60,05×100/99,8 = 60,17 г или ледяной 60,17/1,0503 = 57,3 мл, а 80%-ной уксусной кислоты (плотность 1,070) потребуется 70 мл (расчет такой же) для приготовления 1 л раствора.

19. Раствор сернокислого окисного железа для определения cахаров по Бертрану. 50 г Fe₂(SO₄)₃ и 200 г концентрированной серной кислоты растворяют в 1 л дистиллированной воды. Раствор не должен восстанавливать перманганат калия, поэтому в приготовленный раствор, для окисления возможно присутствующей сернокислой закиси железа FeSO₄, прибавляют по каплям 0,1 н раствор КМnО₄ до слабого поро­зовения.

20. Растворы железоаммонийных квасцов.

а). Для определения cахаров по Бертрану. 86 г Fe₂(SO₄)₃·(NH₄)SO₄·24Н₂О и 108 мл концентрированной серной кислоты раст­воряют в дистиллированной воде и объем доводят до 1 л. Раствор не дол­жен восстанавливать перманганат калия. В раствор железоаммонийных квасцов добавляют по каплям 0,1 н раствор КМnО₄ до появления блед­но-розовой окраски.

б). Для определения cахаров по Макс-Мюллеру. К 250 мл насыщен­ного при температуре 2 – 4°С раствора железоаммонийных квасцов до­бавляют 25 мл концентрированной серной кислоты. Раствор перемеши­вают, охлаждают до 20°С, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем в колбе до метки. Раствор квасцов не должен содержать закисного железа, поэтому его окисляют несколькими кап­лями 0,1 н раствора КМnО₄ до появления устойчивой слабо-розовой окраски.

21. 1 %-ный водный раствор метиленового голубого. 1 г метиленовой сини переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют
в 50 мл дистиллированной воды и доливают водой до метки.

Дата добавления: 2015-07-13