Лабораторная работа №1

Оформить лабораторную работу.

3. Заполнить таблицу: Регуляция обмена углеводов гормонами.

Название гормона	Место синтеза гормона	Процессы углеводного обмена, активируемые гормонами	Изменение концентрации глюкозы в крови как результат действия гормонов
Инсулин
Глюкагон
Адреналин

Ориентировочная основа действия для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время

«Количественное определение содержания глюкозы в крови

глюкозооксидазным методом»

Принцип метода. Ферментативный метод определения глюкозы основан на действии глюкозооксидазы и предназначен для специфического определения глюкозы в биологических жидкостях в присутствии различных сахаров и других редуцирующих веществ неуглеводной природы. Глюкозооксидаза (КФ 1.1.3.4) относится к флавопротеинам (кофермент – ФАД). Глюкоза окисляется при действии фермента с образованием Н₂О₂ и глюконата. Возникшую перекись водорода определяют реакцией, катализируемой ферментом пероксидазой, с последующим окислительным азосочетанием производного фенола с 4-аминофеназоном (хромогенный кислородный акцептор). В ходе реакции образуются окрашенные в розовый цвет продукты. Количественное определение глюкозы заключается в измерении интенсивности окраски красителя и сравнении оптической плотности испытуемой пробы с окраской калибровочного раствора глюкозы.

Порядок выполнения работы:

1). В пробирку №1 (опыт) вносят 0,01 мл сыворотки крови и 1 мл рабочего раствора (ферментно-хромогенная смесь)

2). В пробирку №2 (контроль) вносят 0,01 мл стандартного раствора глюкозы (концентрация глюкозы 10 ммоль/л) и 1 мл рабочего раствора

3) Пробирки перемешивают и инкубируют в термостате 30 минут при 37^оС

4) Измеряют оптическую плотность опытной пробы (А_опыта) и контроля (А_{контроля}) на ФЭКе против дистиллированной воды при длине волны 540 нм в кювете с толщиной оптического слоя 3 см

5) Рассчитывают содержание глюкозы по формуле:

Глюкоза (ммоль/л) = (10×А_опыта): А_{контроля}

В выводах сопоставить величины нормального содержанию глюкозы в крови с данными, полученными в результате проделанной работы. На основании сопоставления сделать заключение о норме или отклонении от нее (гипергликемия, гипогликемия)

Клинико-диагностическое значение. Благодаря существованию ряда сложных нервных и гуморальных регуляторных механизмов концентрация глюкозы в крови сохраняется относительно постоянной – 3.3-5.5 ммоль/л. Концентрация глюкозы в крови зависит от строгой регуляции интенсивности процессов распада и синтеза гликогена, глюконеогенеза, скорости всасывания глюкозы в ЖКТ и окисления ее в тканях с высвобождением энергии.

Гипогликемия – понижение содержания глюкозы в крови. Гипогликемия наблюдается при длительном голодании; сопровождает заболевания поджелудочной железы, опухолевый рост, тяжелые поражения печени, эндокринные нарушения; наблюдается при передозировке инсулина. При гипогликемии ниже 2.7 ммоль/л возникает риск развития гипогликемичекой комы.

Гипергликемия – повышенное содержание глюкозы в крови (более 6 ммоль/л). Физиологическая гипергликемия наблюдается после приема пищи, при эмоциональном стрессе. Гипергликемия сопровождает эндокринные нарушения (сахарный диабет, тиреотоксикоз и др.), заболевания поджелудочной железы (острый и хронический панкреатиты), хронические заболевания печени и почек, сердечно-сосудистые заболевания и др. При гипергликемии выше 22 ммоль/л развивается гипергликемическая кома.

Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

1. Выполните «цепное» задание:

а) у здорового человека в покое через 1 час после еды, содержащей углеводы, в крови повышается концентрация:

A. Глюкозо-6-фосфата

Б. Глюкозы

B. Сахарозы

Г. Лактозы

Д. Мальтозы

б) это вещество в клетках печени вступает в реакцию:

A. Фосфорилирования

Б. Дегидрирования

B. Декарбоксилирования

Г. Изомеризации

Д. Взаимодействия с ГЛЮТ-4

в) эту реакцию в печени катализирует фермент:

А. УДФ-глюкопирофосфорилаза

Б. Глюкозилтрансфераза

В. Глюкокиназа

Г. Фосфоглюкомутаза

Д. Гликогенсинтаза

г) активность этого фермента в печени увеличивается под влиянием гормона:

A. Адреналина

Б. Инсулина

B. Глюкагона

Г. Кортизола

Д. Тироксина

д) действие этого гормона на фермент заключается в:

A. Аллостерической активации

Б. Фосфорилировании и активировании

B. Индукции синтеза

Г. Активации путем отщепления белка-ингибитора Д. Дефосфорилировании

2. Выполните «цепное» задание:

а) у здорового человека через 4-5 часов в покое после еды увеличивается скорость:

A. Всасывания глюкозы в клетки кишечника

Б. Перемещение ГЛЮТ-4 в мембрану клеток печени

B. Транспорт глюкозы в клетки печени

Г. Распад гликогена в печени

Д. Синтез гликогена в печени и мышцах

б) в ходе этого процесса в печени происходит реакция:

A. Фруктозо-1-фосфат - Фруктозо-6-фосфат

Б. Гликоген - Глюкозо-1-фосфат

B. Глюкозо-6-фосфат - УДФ-глюкоза

Г. Глюкоза - Глюкозо-6-фосфат

Д. Глюкозо-6-фосфат - Глюкозо-1-фосфат

в) эту реакцию катализирует фермент:

A. Гексокиназа

Б. Глюкозо-6-фосфатаза

B. Фосфоглюкомутаза

Г. Гликогенфосфорилаза

Д. Олигосахаридтрансфераза

г) этот фермент активируется под влиянием гормона:

A. Инсулина

Б. Альдостерона

B. Глюкагона

Г. Кортизола

Д. Тироксина

д) механизм действия этого гормона включает (выберите все правильные ответы):

А. Взаимодействие с мембранным рецептором

Б. Внутриклеточный каскад реакций, усиливающий действие гормона

В. Снижение концентрации цАМФ в клетке

Г. Дефосфорилирование регуляторных ферментов

Д. Фосфорилирование регуляторных ферментов

Этапы проведения занятия:

§ Вводная беседа – 5 мин

§ Обсуждение теоретических вопросов - 40 мин

§ Выполнение лабораторной работы – 30 мин

§ Выполнение заданий для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время – 10 мин

§ Подведение итогов занятия - 5 мин

Оценивание уровня сформированности компетенций обучающихся проводится по балльно – рейтинговой системе.

Дата добавления: 2014-12-27