Рефрактометрическим методом

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 4

В МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ МЕТОДОМ БЛАЯ-ДАЕРА

ИЗВЛЕЧЕНИЕ ЛИПИДОВ ИЗ МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 3

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЖИРА

Ц е л ь р а б о т ы - ознакомиться с методом извлечения липидов из мышечной ткани и количественного определения содержания липидов в мышечной ткани.

Оборудование, реактивы, материалы:

Воронки делительные; колбы; аппарат для встряхивания; воронка Бюхнера; баня водяная ткань мышечная; жир; хлороформ; спирт этиловый.

Порядок выполнения работы

Взвешивают 10 г измельченной мышечной ткани, помещают в колбу емкостью 500 мл. Приливают 130 мл этанола, экстрагируют в течение нескольких минут, добавляют 65 мл хлороформа. Содержимое колбы встряхивают в течение 10 мин на аппарате для встряхивания, затем добавляют 65 мл хлороформа и встряхивают в течение 5 мин, добавляют еще 65 мл воды, продолжают перемешивание в течение 30 с. Далее смесь фильтруют. Полученный фильтрат помещают в делительную воронку. Происходит расслаивание фильтрата на две фазы: нижний хлороформный слой содержит липиды, верхний - нелипидные компоненты. Нижний хлороформный слой сливают в предварительно взвешенную фарфоровую чашку, упаривают на кипящей водяной бане.

Фарфоровую чашку охлаждают, взвешивают. Липидный слой с поверхности чашки смывают хлороформом из расчета 1 мл на 100 г жира.

Кроме мышечной ткани для анализа можно использовать жиры. Навеску исследуемого жира растворяют в хлороформе из расчета 1 мл на 100 мг образца.

Расчетная формула: w_(жира) = m₁ - m_{2 *} 100%,

m

где w_(жира) - массовая доля жира в мышечной ткани,%; m - масса навески, г; m₁ - масса фарфоровой чашки с жиром, г; m₂ - масса чистой фарфоровой чашки, г.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЖИРА

Ц е л ь р а б о т ы - определить содержание жира в пищевом сырье рефрактометрическим методом.

Метод основан на определении разности показателей преломления мисцеллы и чистого растворителя.

Оборудование, реактивы, материалы:

Рефрактометр; ступки фарфоровые; спирт этиловый; a-хлорнафталин;

a-бромнафталин; жир.

Порядок выполнения работы

В фарфоровую ступку помещают 2 г исследуемого образца, приливают 5 мл растворителя (a-хлорнафталина или a-бромнафталина). Навеску с растворителем растирают ластиком в течение 5 мин, полученную массу фильтруют через бумажный складчатый фильтр. Одну-две капли полученного фильтрата наносят стеклянной палочкой на нижнюю призму рефрактометра, имеющего шкалу с диапазоном n = 1,3-1,7, закрывают верхнюю призму и через 1-2 мин определяют показатель преломления мисцеллы.

Аналогично определяют показатель преломления чистого растворителя.

Расчетная формула:

Массовую долю жира w(%) рассчитывают по формуле:

w = am₁(n₀ – n)_*10⁴,

m

где m₁ - масса растворителя, г; m - масса исследуемого образца, г;

n - показатель преломления мисцеллы; n₀ - показатель преломления чистого растворителя; a - показатель отношения процентного содержания жира в растворе разности между показателями преломления растворителя и мисцеллы.

Так как m₁, m, a являются постоянными величинами, выражение

К = 10⁴a m₁ можно заменить обозначением П_В, тогда w_(жира)

m

определяют по формуле: w_(жира) = П_ВDn.

Значения a и П_В приведены в таблице 8.

Таблица 8.

Растворитель	a	ПВ
a-бромнафталин	0,0407
a-хлорнафталин	0,0612
Трикрезилортофосфат	0,1212

Дата добавления: 2015-07-13